化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0297 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液 1毫升/500毫摩爾
細(xì)胞脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
植物脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 2
超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液 1毫升/500毫摩爾
細(xì)胞脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
植物脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測試劑盒 2
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| NCI-H460 [H460] (大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0297 |
商品介紹：
名稱 NCI-H460 [H460] (大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 別稱NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460 種屬人類 年齡（性別）男性 組織來源肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；大細(xì)胞肺癌 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述NCI-H460細(xì)胞是從一位大細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的。NCI-H460細(xì)胞表達(dá)的p53 mRNA易于檢測，其水平與正常肺細(xì)胞相當(dāng)，未表現(xiàn)出NCI-H460細(xì)胞DNA總體結(jié)構(gòu)異常。NCI-H460細(xì)胞角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性；神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~23-60小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice. |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠NAD(P)H脫氫(醌)1(NQO1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)免疫試劑盒*直銷
兔子游離脂肪酸(FFA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)免疫試劑盒*直銷
大鼠Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒*直銷
大鼠凝聚素(CLU)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠I型膠原(COL1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
倉鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒*直銷
大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
NCI-H460 [H460] (大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 1瓶 JAR細(xì)胞株 JAR 低溫運(yùn)輸和保存
無菌取樣袋（帶鐵絲）（30cm*18cm） 50個/包*4
1mg 化蛋白A Biotin-Protein A -20℃保存
50mL Sodium Orthovanadate Solution（正釩酸鈉溶液），100mM Sodium Orthovanadate Solution，100mM 常溫保存
1 管 GS190酵母菌 Pichia pastoris Strain GS115 -80℃保存
2 ug pShuttle-CMV pShuttle-CMV 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 柱式細(xì)菌RNAout Column Bacterial RNAOUT 4℃保存
化工儀器網(wǎng)