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          NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-08 15:38:54瀏覽次數(shù):293

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0550 應用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞)的相關(guān)*:純化RNA樣品儲存液 50毫升
          RNA溶液(RNA保護分析) 50毫升
          50倍Dendhart核酸雜交封閉溶液 100毫升
          微型RNA(miRNA)試劑專題
          總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒 20次
          總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒 10次

          詳細介紹

          公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

          產(chǎn)品名稱

          NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0550

          產(chǎn)品介紹:

          名稱    NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞)

          年齡(性別)10周齡

          組織來源胰腺/朗格漢斯胰島

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          生物安全等級2

          生長培養(yǎng)基Ham's F-12K10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:3

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO25%

          溫度:37℃

          細胞特點及處理:

          產(chǎn)品特點:

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細胞處理:

          1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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          細胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時的注意事項:

          1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

          4. 冷凍保存的細胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

          4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

          4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

          5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

           PNMT 基因全長ORF克隆

           SCYL3 基因全長ORF克隆

           PPP1R14D 基因全長ORF克隆

           LPAL2 基因全長ORF克隆

           PAN2 基因全長ORF克隆

           UBASH3B 基因全長ORF克隆

           EIF4B 基因全長ORF克隆

           MSN 基因全長ORF克隆

           DES 基因全長ORF克隆

           PPP5C 基因全長ORF克隆

          NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞)42℃生長試驗生化管  20支/盒

          2 ug pCAMBIA1301 pCAMBIA1301 低溫運輸,-20℃保存

          3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂 3% NaCl Tryptic Soy Agar 250g

          5g 氫化松 Hydrocortisone  

          50T 口蹄疫病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

          500 mL MEM培養(yǎng)基(含1%雙抗) Cell Culture Medium -20℃保存

          500mL Acrylamide: Bis-acrylamide Solution(丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液),39:1   Acrylamide: Bis-acrylamide Solution,39:1   常溫保存

          使用方法:

          收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

          3. 細胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

           

           


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