產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
腹膜間皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1225 |
商品介紹:
名稱 腹膜間皮細胞 2.組織來源:腹膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人腹膜間皮細胞分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積最大、配布最復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構(gòu)成間皮的細胞,正常大小約為15-25微米,細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,不會互相磨損受傷。而間皮所的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質(zhì)來達成,分泌物多半為細胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)。 5.方法簡介: 實驗室分離的人腹膜間皮細胞采用混合膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的人腹膜間皮細胞經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H180 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Transferrin / TF ELISA配對抗體
甲型流感 H9N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體
甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 / Capsid Protein p24 ELISA配對抗體
TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體
Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對抗體
IL1R2 / IL1RB / CD121b ELISA配對抗體
IL17RA / CD217 ELISA配對抗體
Apolipoprotein H / APOH ELISA配對抗體
CD40 / TNFRSF5 ELISA配對抗體
腹膜間皮細胞Enterobacter cloacae程序性死亡分子-1檢測試劑盒
Clostridium acetobutylicum草膦乙酰轉(zhuǎn)移檢測試劑盒
Enterobacter cloacae苯檢測試劑盒
Micrococcus luteus苯檢測試劑盒
Micrococcus luteus;蛋白檢測試劑盒
Micrococcus luteus鳥苷酸激檢測試劑盒
Corynebacterium gultamicum淀粉化檢測試劑盒
Corynebacterium gultamicumAtxin-3蛋白檢測試劑盒