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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-02 16:40:42瀏覽次數(shù)：323
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0087 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| H4 (腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0087 |
商品介紹：
名稱 H4 (腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 別稱H-4 年齡（性別）37歲 組織來源腦組織 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述H4細(xì)胞建系于1973年；它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。H4細(xì)胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽，細(xì)胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。H4細(xì)胞具有修復(fù)MNNG損傷5型腺病毒的能力。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium. |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Ephrin-B2(EFNB2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒*直銷
CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)免疫試劑盒*直銷
肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒*直銷
EB病毒核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
H4 (腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)2 ug pET-43.1a(+) pET-43.1a(+) 低溫運輸，-20℃保存
金氏B培養(yǎng)基 King’s B medium 250g
1瓶 A549細(xì)胞株 A549 低溫運輸和保存
1套 玻璃勻漿器,10 mL Glass Homogenizer 常溫保存
150次 天凈沙DNA甲基化修飾試劑盒 Embedded Bisulfite Modification Kit ，常溫保存，蛋白K需要-20℃保存。
100mL MOPS Buffer,0.5M,pH8.0 MOPS Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
100uL 氨芐抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
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