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          GNM (口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-02 16:39:39瀏覽次數(shù):798

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0086 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          GNM (口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)的相關(guān)*:苦玄參 規(guī)格: 1g
          57-13-6尿 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg
          130-95-0奎寧 規(guī)格: 20mg
          番瀉葉 規(guī)格: 0.5g
          229977-93-9嘧螨酯;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
          61276-17-3甾 規(guī)格: 20mg
          托吡酯 規(guī)格: 100mg
          158196-34-0柚皮-7-O-醛 規(guī)格: HPLC≥98

          詳細介紹

          公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

          產(chǎn)品名稱

          GNM (口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0086

          產(chǎn)品介紹:

          名稱    GNM (口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基RPMI-164020% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37℃

          細胞特點及處理:

          產(chǎn)品特點:

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細胞處理:

          1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          QQ截圖20210907103850.png

           

          細胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時的注意事項:

          1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

          4. 冷凍保存的細胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

          4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

          4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

          5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

          腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)免疫試劑盒*直銷

          胰淀粉(PAMY)免疫試劑盒進口、組裝

          兔子基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒進口、分裝

          FMS樣酪激3配體(Flt-3L)免疫試劑盒*直銷

          前膠原C端肽(PCP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          兔子雌二醇(E2)免疫試劑盒進口、分裝

          小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒*直銷

          馬環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒進口、組裝

          大鼠細胞膜鈣轉(zhuǎn)運ATP1(ATP2B1)免疫試劑盒*直銷

          GNM (口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)1瓶 SK-NEP-1細胞株 SK-NEP-1 低溫運輸和保存

          高鹽瓊脂 Mannitol Salt Agar 250g

          5g 2,5- 二苯基惡唑 2,5-Diphenyloxazole(PPO) 室溫保存

          50T 霍亂弧菌PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

          100mL 酪蛋白溶液 Casein Blocking Solution -20℃保存

          2 ug pYRP7 pYRP7 低溫運輸,-20℃保存

          1mg 羧肽 Y( 酵母 ) Carboxypeptidase Y -20℃保存

          使用方法:

          收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

          3. 細胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

           

           

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