化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠脂肪細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1275 |
商品介紹：
名稱 大鼠脂肪細胞 2.組織來源：脂肪組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞，常呈白色，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達到，此后數(shù)量一般不再增加。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外，還有一種褐色脂肪細胞，在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍，含有高度團縮的褐色脂肪，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠脂肪細胞采用胰蛋白酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠脂肪細胞經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R199 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ADK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ACLY / acly / ATP citrate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ACO1 / irp1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠脂肪細胞人心肌特異性肌鈣蛋白TBacillus pumilus血小板衍生生長因子α受體檢測試劑盒
人肌球蛋白重鏈Bacillus pumilus血小板衍生生長因子β受體檢測試劑盒
人熱休克蛋白27Bacillus pumilus血小板衍生生長因子受體檢測試劑盒
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白Bacillus pumilus血小板衍生生長因子檢測試劑盒
人心型脂肪酸結合蛋白Bacillus pumilus血小板源性生長因子D檢測試劑盒
人腦型脂肪酸結合蛋白Bacillus pumilus循環(huán)復合物檢測試劑盒
人血管舒緩激肽Bacillus pumilus煙酰單核苷酸轉(zhuǎn)移3檢測試劑盒
人肌球蛋白輕鏈Bacillus pumilus煙酰腺嘌呤二核苷酸檢測試劑盒
化工儀器網(wǎng)