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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-06 10:42:30瀏覽次數(shù)：303
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0191 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0191 |
商品介紹：
名稱 RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 別稱RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3 種屬大鼠 年齡（性別）不詳 組織來源外周血；化學(xué)誘變嗜堿性細(xì)胞；白血病 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述RBL-2H3細(xì)胞是1978年國立牙科研究所的免疫學(xué)實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細(xì)胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細(xì)胞株。RBL-2H3細(xì)胞具有高親和力的IgE受體，通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。RBL-2H3細(xì)胞廣泛地用于研究肥大細(xì)胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細(xì)胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細(xì)胞分泌的不同方面，包括細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細(xì)胞的生長，但在某些批號中FcERI集聚后脫?；酶谩Ａ硪恢甏笫笫葔A性細(xì)胞株(RBL)不會脫?；?。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM＋15%FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-60小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 受體表達(dá)情況FcERI (Fc of IgE) 基因表達(dá)情況histamine |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠兒茶抑素免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
猴骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2型(BMPR2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
犬P選擇素(SELP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
白介素1受體相關(guān)激-4(IRAK-4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6/MUC1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
甲狀旁腺激素(PTH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
沙眼衣原體抗原(CT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)雙水解試驗用培養(yǎng)基（AD） Aaginine dehydrolase Medium 5g
5g Inosine，F(xiàn)ree Base 室溫干燥保存
50T 淋球菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
25 mg DiBAC4（3） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
50mL Ammonium Acetate Solution（乙酸銨溶液）,1M Ammonium Acetate Solution,1M 常溫保存
10mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存
2 ug pYX212-VHB pYX212-VHB 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
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