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          DLD-1 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-02 16:19:33瀏覽次數(shù):415

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0074 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          DLD-1 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞) 的相關(guān)*:通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒 10次
          通用型DNA平滑末端連接克隆*試劑盒(包括內(nèi)切酶) 10次
          pZERO載體克隆試劑盒(不包括內(nèi)切酶) 10次
          pZERO載體克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶) 10次
          GMS10電擊感受態(tài)細轉(zhuǎn)化試劑盒 10次
          pZERO載體克隆鑒定試劑盒 20次
          PCR產(chǎn)物末端平滑處理試劑盒 20次
          DNA產(chǎn)物磷

          詳細介紹

          公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

          產(chǎn)品名稱

          DLD-1 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0074

          產(chǎn)品介紹:

          名稱    DLD-1 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞)

          別稱DLD 1; DLD1; CoCL3

          種屬人類

          年齡(性別)成人

          組織來源結(jié)直腸腺癌上皮細胞

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          背景描述DLD-1細胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細胞與HCT-15細胞相似,說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。DLD-1細胞和HCT-15細胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實,但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細胞的CSAp陰性(CSAp-),p53抗原表達呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sisfos的表達呈陽性,癌基因N-myc的表達未做檢測。DLD-1細胞表達腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2CC-3、CC-4CC-5CC-6。1979年提交到ATCCDLD-1細胞代數(shù)不明且污染了支原體,其后經(jīng)過12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理,處理之后每周用Hoechst染色和標準培養(yǎng)法檢測。其后連續(xù)11個月不加抗生素培養(yǎng),DLD-1細胞所有的檢測呈陰性。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~24-48小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO25%

          溫度:37℃

          致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

          抗原表達情況Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re

          基因表達情況carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.

          細胞特點及處理:

          產(chǎn)品特點:

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細胞處理:

          1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          QQ截圖20210907103850.png

           

          細胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時的注意事項:

          1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

          4. 冷凍保存的細胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

          4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

          4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

          5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

          內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)免疫試劑盒進口、分裝

          微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)免疫試劑盒進口、組裝

          魚褪黑素(MT)免疫試劑盒進口、分裝

          大鼠低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)免疫試劑盒進口、分裝

          T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒進口、組裝

          大鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒進口、分裝

          小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          補體因子B前體(pre-CFB)免疫試劑盒進口、組裝

          抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          DLD-1 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞) 250mL PIPES Buffer,1.0M, pH6.8  PIPES Buffer,1.0M, pH6.8  常溫保存

          100mL 酵母及產(chǎn)孢培養(yǎng)基 Growth and Sporulation Medium 常溫

          2 ug pPICZ C pPICZ C 低溫運輸,-20℃保存

          乳糖(腦膜炎奈瑟氏菌專用)  20ml/支

          2 ug pBudCE4.1 pBudCE4.1 低溫運輸,-20℃保存

          嗜鹽菌選擇性瓊脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250g

          1g 肝素鋰 Heparin Lithium Salt  室溫保存

          使用方法:

          收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

          3. 細胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

           

           

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