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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-06 09:05:33瀏覽次數(shù)：304
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0123 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| IMR-32 (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0123 |
商品介紹：
名稱 IMR-32 (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 別稱IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320 年齡（性別）男 組織來(lái)源神經(jīng)母細(xì)胞瘤，大腦 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述IMR-32細(xì)胞是由W·W·Nichols、J·Lee和S·Dwight于1967年4月從一位13個(gè)月大的男嬰下腹部腫瘤中分離建系。診斷認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤，并有少部分區(qū)域的器質(zhì)性分化。IMR-32細(xì)胞包括兩種類型的細(xì)胞：主要的是小的神經(jīng)母細(xì)胞樣的細(xì)胞；另一種是大的透明成纖維樣細(xì)胞。IMR-32細(xì)胞提交到ATCC時(shí)已經(jīng)傳到第36代，已經(jīng)證明細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)到80代以上。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~20-50 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠白介素17(IL-17)免疫試劑盒*直銷
雞新城疫病毒(NDV)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)免疫試劑盒*直銷
膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗體(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
犬α-3干擾素(IFN-α3)免疫試劑盒*直銷
兔子8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒*直銷
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
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D-乳酸免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
α-烯醇化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
IMR-32 (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)125mL RNase-Free TE Buffer（無(wú)RNase的TE緩沖液），pH8.0 RNase-Free TE Buffer，pH8.0 常溫保存
1瓶 2V6.11細(xì)胞株 2V6.11 低溫運(yùn)輸和保存
2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 血液RNAout Blood RNAOUT 4℃保存
2 ug pcDNA3-YFP pcDNA3-YFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
面包酵母標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基 250g
25mL 四甲基乙二胺 N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine(TEMED) 4℃避光保存
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