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          NCI-H1975 (肺腺癌細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-06 14:47:57瀏覽次數(shù):377

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0296 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          NCI-H1975 (肺腺癌細胞) 的相關(guān)*:體內(nèi)(in vivo)超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒 20次
          酵母超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒 20次
          植物超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒 20次
          甲萘醌溶液(1毫摩爾) 50毫升
          過氧亞硝基陰離子解構(gòu)劑FeTMPyP pentachloride 1毫升/1毫摩爾
          過氧亞硝基陰離子清除劑硫化乙醇胍琥珀酸鈉 1毫升/5毫摩

          詳細介紹

          使用方法:

          收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

          3. 細胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

          公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

          產(chǎn)品名稱

          NCI-H1975 (肺腺癌細胞)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0296

           產(chǎn)品介紹:

          名稱    NCI-H1975 (肺腺癌細胞)

          別稱H1975; H-1975

          種屬人類

          年齡(性別)女性

          組織來源器官:肺;疾?。合侔?;非小細胞肺癌

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          背景描述NCI-H1975細胞是于19887月從一名女性(無抽煙史)非小細胞肺腺癌組織中分離得到的。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~28-45小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37℃

          細胞特點及處理:

          產(chǎn)品特點:

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細胞處理:

          1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          QQ截圖20210907103850.png

           

          細胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時的注意事項:

          1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

          4. 冷凍保存的細胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

          4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

          4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

          5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

          犬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒進口、分裝

          EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

          抗組氨?;?/span>tRNA合成,細胞質(zhì)(HARS)抗體免疫試劑盒進口、分裝

          大鼠P0蛋白(p0)免疫試劑盒*直銷

          異常凝血原(APT)免疫試劑盒進口、分裝

          小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          大鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒進口、分裝

          大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)免疫試劑盒進口、組裝

          馬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒*直銷

          山羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          NCI-H1975 (肺腺癌細胞) 250g 蛋白胨 Peptone 室溫保存

          50T 人黏附分子CD44基因PCRPCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

          100μL Ac-DEVD-CHO(Caspase 3抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

          250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH5.0   Citrate Buffer,0.5M,pH5.0   常溫保存

          10次 DNA 5’末端標記試劑盒 DNA 5’ End-Labeling Kit -20℃保存

          2 ug pHT304 pHT304 低溫運輸,-20℃保存

          龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) Crystal violet blood agar base 250g

           


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