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          GES-1 (胃粘膜細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-08 15:12:57瀏覽次數(shù):279

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0551 應用領域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          GES-1 (胃粘膜細胞)的相關(guān)*:胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒 20次
          胞漿微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒 10次
          胞核微型RNA(Pre-RNA)電泳法分離試劑盒 20次
          胞核微型RNA(Pre-RNA)超濾法分離試劑盒 10次
          微型RNA(miRNA)擴增試劑盒 20次
          通用型微型RNA(miRNA)擴增試劑盒 20次

          詳細介紹

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          GES-1 (胃粘膜細胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0551

          商品介紹:

          名稱    GES-1 (胃粘膜細胞)  

          別稱GES1

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37℃

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           SELPLG 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

           ADK 基因全長ORF克隆

           SLC27A4 基因全長ORF克隆

           SOX15 基因全長ORF克隆

           SCN2B 基因全長ORF克隆

           UBTD2 基因全長ORF克隆

           C1orf105 基因全長ORF克隆

           E2F3 基因全長ORF克隆

           EPYC 基因全長ORF克隆

           VASN 基因全長ORF克隆

          GES-1 (胃粘膜細胞)2500mL TBE電泳液,10× TBE Buffer, 10× 常溫

          2 ug pGBKlam pGBKlam 低溫運輸,-20℃保存

          制備培養(yǎng)基  

          1瓶 COLO205細胞株 COLO205 低溫運輸和保存

          100ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 90ml/袋*10

          500U Dam 甲基轉(zhuǎn)移 Dam Methyltransferase -20℃保存

          100mL PIPES Buffer,0.5M, pH7.0  PIPES Buffer,0.5M, pH7.0  常溫保存

           


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