詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0179 |
商品介紹:
名稱 P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細胞) 別稱P-388D1; P388-D1; P388.D1; P3 88 D1 種屬小鼠 年齡(性別)不詳 組織來源淋巴瘤 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述P388D1細胞來源于甲基膽蒽誘導(dǎo)形成的淋巴瘤;在LPS和佛波酯的誘導(dǎo)下,P388D1細胞可以產(chǎn)生IL-1,還可以產(chǎn)生溶菌酶;可以吞噬酵母多糖和乳膠微球,在抗體依賴的、細胞介導(dǎo)的細胞毒系統(tǒng)中有活性。P388D1細胞表面免疫球蛋白(sIg)陰性,鼠痘病毒陰性。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% HS+1% P/S 推薦傳代比例2-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). 注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
猴子雌激素(E)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
牛羥脯(Hyp)免疫試劑盒進口、分裝
山羊催乳素(PRL)免疫試劑盒進口、分裝
雞天門冬氨基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
雞白介素6受體(IL-6R)免疫試劑盒進口、組裝
1,3-二甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
綿羊免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒進口、分裝
抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒進口、分裝
檸檬酸合成,線粒體(CS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細胞)1 管 Turbo大腸桿菌 Turbo E.coli Strain -80℃保存
2 ug pSG1154 pSG1154 低溫運輸,-20℃保存
50次 柱式白色念珠菌RNAout
2 ug pCL-Ampho pCL-Ampho 低溫運輸,-20℃保存
四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 250g
100g L- 鹽酸鹽 L-Ornithine HCl 密封干燥保存
50T 犬細小病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存