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          HuH-7 (肝癌細(xì)胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-06 08:56:47瀏覽次數(shù):409

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0119 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          HuH-7 (肝癌細(xì)胞) 的相關(guān)*:Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml
          C12ORF4 12號染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格: 0.2ml
          IL-22R 白介素-22受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
          REM/GTP binding protein REM1 GTP結(jié)合蛋白REM1抗體 規(guī)格

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          HuH-7 (肝癌細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0119

          商品介紹:

          名稱    HuH-7 (肝癌細(xì)胞)  

          別稱HuH-7; HUH-7; HuH7; Huh7; HUH7; JTC-39; Japanese Tissue Culture-39

          種屬人類

          年齡(性別)男性

          組織來源肝;肝癌

          生長特性貼壁細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          背景描述據(jù)說,HuH-7細(xì)胞可產(chǎn)甲胎蛋白、胰酶α抗體、血漿銅藍(lán)蛋白、纖維蛋白原、纖維粘連蛋白等。

          生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO25%

          溫度:37℃

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          犬弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          γ-1 鏈C 區(qū)(IGHGI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          山羊白介素1α(IL-1α)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          小鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          大鼠促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          B因子(BF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          牛胱天蛋白1(Casp-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          犬甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          HuH-7 (肝癌細(xì)胞) 2 ug pCMV5 (no Nde I) pCMV5 (no Nde I) 低溫運輸,-20℃保存

          亞硫酸鐵瓊脂  250g

          2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP 低溫運輸,-20℃保存

          50T 人E-選擇素S128R基因多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)  低溫運輸,-20℃保存

          25 mg SPQ(6-甲氧基-N-(3-磺丙基)) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

          500mL Carbonate Buffered Saline(鹽緩沖鹽水),5X,pH9.0   Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.0   常溫保存

          10mL 電泳級二甲苯藍(lán)FF溶液 Xylene Cyanol Solution,EG 常溫密封干燥避光保存

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