詳細(xì)介紹
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
以下是包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝的詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱:包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝
規(guī)格:100次
編號(hào):GOY-P4033
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)技術(shù)特點(diǎn):
1包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對(duì),結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
oxidized high density lipoprotein,Ox-HDL ELISA Kit駱駝AST elisa檢測試劑盒3-Hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one
oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit駱駝GSH-PX elisa檢測試劑盒Ethyl 3-(4-hydroxyphenyl)propionate
oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit駱駝Lp-PL-A2 elisa檢測試劑盒1-O-p-Coumaroylglycerol
EloA ELISA Kit駱駝TGFβ2 elisa檢測試劑盒Kmeriol
nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit駱駝β-EP elisa檢測試劑盒Triandrin
nicotinamide adenine dinucleotide,NAD ELISA Kit驢E2 elisa檢測試劑盒γ-Asarone
Cementum Protein 1,CEMP-1 ELISA Kit驢FSH elisa檢測試劑盒Methoxyeugenol
Dentin Matrix Protein 1,DMP1 ELISA kit驢HA elisa檢測試劑盒Hydrocinnamic acid
circulating immune complex,CIC ELISA Kit驢LH elisa檢測試劑盒Methyleugenol
spectrin ELISA kit驢PROG elisa檢測試劑盒3,4-Dimethoxycinnamyl alcohol
PDGFsR-α ELISA kit馬17-OHP elisa檢測試劑盒Ethyl ferulate
Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit馬ACTH elisa檢測試劑盒trans-Methylisoeugenol
platelet factor 3,PF3 ELISA Kit馬Albumin elisa檢測試劑盒Methyleugenolglycol
platelet-derived growth factor CC,PDGF-CC ELISA Kit馬ANG-Ⅱ elisa檢測試劑盒erythro-1-Phenylpropane-1,2-diol
Platelet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISA kit馬Aβ1-40 elisa檢測試劑盒Octadecyl caffeate
Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit馬cAMP elisa檢測試劑盒Acantrifoside E
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝PRKD1(Ser738) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體規(guī)格 0.1ml
PRKCZ(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體規(guī)格 0.2ml
PRKCZ(Thr410) 磷酸化蛋白激酶C(T410)抗體規(guī)格 0.1ml
PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體規(guī)格 0.1ml
PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體規(guī)格 0.1ml
PRKCQ(Ser676) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體規(guī)格 0.1ml
PRKCB(Ser660) 磷酸化蛋白激酶C抗體規(guī)格 0.1ml