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          非RNA 級(jí) PVP K30)100g圖片

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          更新時(shí)間:2019-03-07 16:49:20瀏覽次數(shù):374

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100g
          貨號(hào) GOY2419 主要用途 僅用于科研
          非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過(guò),某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。

          詳細(xì)介紹

          以下是非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片的訂購(gòu)信息!點(diǎn)擊了解公司更多產(chǎn)品!

          產(chǎn)品名稱(chēng)非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片
          規(guī)格100mL
          價(jià)格電詢(xún)

          公司非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更RNA純化。
          1、RNA純化系列產(chǎn)品
          2、DNA純化系列產(chǎn)品
          3、電泳及回收系列產(chǎn)品
          4、探針標(biāo)記及檢測(cè)系列產(chǎn)品
          5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
          6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
          7、基因組研究系列產(chǎn)品
          8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
          9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
          10、即用型溶液、質(zhì)粒庫(kù)、菌種庫(kù)等等
          非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片的詳細(xì)介紹:

          非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片DNA提取流程圖:

          問(wèn):常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些?
          稱(chēng)答非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片回收得到的DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過(guò)對(duì)比定量的Marker 來(lái)定量濃度;紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說(shuō)明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
          問(wèn):長(zhǎng)段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題?
          答:當(dāng)DNA段長(zhǎng)度較長(zhǎng)(5   kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見(jiàn)現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問(wèn)題:
              1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
              2 由于長(zhǎng)段DNA 不易從樹(shù)脂上洗脫下來(lái),建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
              3 減少操作過(guò)程中對(duì)長(zhǎng)段DNA 的物理?yè)p傷,如混合振蕩操作不要過(guò)于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。

          注意事項(xiàng):
          ●溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無(wú)水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無(wú)水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無(wú)水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
          ● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類(lèi)沒(méi)有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒(méi)有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
          ● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
          ● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
          ● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
          ● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
          ● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
          ● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
          ● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。葉酸    59-30-3    
          2-羥基喹啉    59-31-4    
          (S)-2-甲基吡咯烷    59335-84-1    
          鹽酸    593-51-5    
          吡咯烷-3-甲酸    59378-87-9    
          1-Boc-3-吡咯烷甲醛    59379-02-1    
              593-81-7    
          2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯    59382-59-1    
          *基膦    594-09-2    
          3-氯-2-硝基苯胺    59483-54-4    
          DL-蛋氨酸    59-51-8    
          1-甲基吡唑-4-甲酸    5952-92-1    
          二甲基丙二酸    595-46-0    
          4-溴-2-甲氧基苯胺    59557-91-4    
          3-氨基-2-萘甲酸    5959-52-4    
          2,2-二甲基-3-羥基丙醛    597-31-9    
          2,2-二甲基丁二酸    597-43-3    C2orf60    2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框60抗體
          phospho-CDK7     磷酸化周期素依賴(lài)性激酶7抗體
          Phospho-CDK9     磷酸化周期素依賴(lài)性激酶9抗體
          phospho-CHEK1     磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體
          phospho-CHEK1    磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體
          phospho-CDKN2A     磷酸化抑癌基因p16抗體
          phospho-CDKN2A     磷酸化抑癌基因p16抗體
          phospho-CDKN2A     磷酸化抑癌基因p16抗體
          phospho-CREB-1    磷酸化CREB-1抗體
          phospho-CSF2RB     磷酸化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體
          phospho-CDH2     磷酸化N-鈣粘附分子抗體
          phospho-CDC27     磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體
          phospho-c-Abl    磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
          phospho-c-Abl    磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
          C9orf75    9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框75抗體
          CD4    CD4抗體
          CD42b    血小板糖蛋白GPIb抗體
          CARM1    蛋白精氨酸N甲基4抗體
          phospho-CARM1    磷酸化蛋白精氨酸N甲基4抗體
          phospho-CDK6     磷酸化周期素依賴(lài)性激酶6抗體
          非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片phospho-CBL2     磷酸化原癌基因CBL2抗體
          2-甲酸乙酯苯磺酰胺    59777-72-9    
          2,5-二氯煙酸    59782-85-3

          操作步驟:
          1  非RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g圖片切取含有目的DNA段的瓊脂糖凝膠條帶。
             ● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
             ● 切膠時(shí),請(qǐng)使用長(zhǎng)波長(zhǎng)UV  (360 nm )光盒。且不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
          2  稱(chēng)取凝膠的重量近似地確定其體積。
             ● 凝膠重量的稱(chēng)量方法:取1.5 ml 離心管電子天平稱(chēng)初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱(chēng)終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱(chēng)量。
          3  按照每100 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)100 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
          4  50 ℃水浴7-10min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
             ● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DN段的回收效率。
             ● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
             ● 若此時(shí)溶液變紅,可加10 µl 3M NaAC  (pH 5.2)。
          5  將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
             ● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA  的能力較弱。
          6  12,000 rpm 離心1min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
             ● 此時(shí)DNA 片段被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
          7  加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液
          8  加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液。
             ● 溶液PE 初次使用前用無(wú)水乙醇按1: 4 稀釋?zhuān)春?0% 乙醇。
             ● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 片段。
          9  加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液。
          10 12,000 rpm 離心  3min ,以*去除純化柱中的液體。
             ● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 片段的充分溶解。
          11  將離心柱置于新的1.5 ml 離心管中。向純化柱的中央處,懸空滴加30-100 µl 溶液Eluent  (60℃預(yù)熱),靜置2min 。12,000 rpm  離心1min,管底即為目的DNA 片段。貯存于-20℃。
             ● 溶液Eluent 可用無(wú)菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的片段的多少、用戶(hù)對(duì)目的片段濃度要求而定。
             ● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA 目的片段的產(chǎn)量。

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