詳細(xì)介紹
柯拉松血吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
柯拉松血吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
柯拉松血吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
俄勒岡地鼠英文名稱:Oregon vole
木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肝內(nèi)膽管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Super-Bradford蛋白定量試劑盒200ml國(guó)產(chǎn)
QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PBST500ml國(guó)產(chǎn)gersion
M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2
MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2gersion
MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
柯拉松血吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒品牌phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體 0.1ml
SIGLEC14 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體 0.2ml
CDC14B 細(xì)胞分裂周期蛋白14B抗體 0.2ml
phospho-p107(Thr369) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
SKALP/Elafin 彈性蛋白酶抑制劑抗體 0.2ml
HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
phospho-VEGFR2 (Tyr1175) 磷酸化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.1ml
ARSA 芳香基硫酸酯酶1抗體 0.2ml
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 0.1ml
DCHS1 鈣粘蛋白19抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。