詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名稱:DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solutionCAS號:1309573-60-1分子式:分子量:
辛酰分子式:158.24分子量: C8H18N2O英文名稱:Xin XianjingCAS號:6304-39-8
精吡氟禾草靈英文名稱:Fluazifop-p-butylCAS號:79241-46-6分子式:383.36分子量: C19H20F3NO4
龍膽苦苷英文名稱:GentiopicrosideCAS號:20831-76-9分子式:356.33分子量:C16H20O9
DBD-ED分子式:285.32分子量: C10H15N5O3S英文名稱:dbd-edCAS號:189373-41-9
四氫呋(THF)分子式:72.11分子量: C4H8O英文名稱:Tetrahydrofuran (THF)CAS號:109-99-9
氟鈦分子式:104.86分子量: F3Ti英文名稱:Titanium fluorideCAS號:13470-08-1
(S)-3-四氫呋分子式:87.12分子量: C4H9NO英文名稱:(S) -3- amino tetrahydrofuranCAS號:104530-79-2
四氯酞英文名稱:Four + phthalideCAS號:27355-22-2分子式:271.9分子量: C8H2Cl4O2
蘇木精英文名稱:Su MujingCAS號:517-28-2分子式:302.28分子量: C16H14O6
2,4-二溴甲分子式:249.93分子量: C7H6Br2英文名稱:2,4- dibromo tolueneCAS號:31543-75-6
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌Galectin 9 半乳糖凝集素9抗體 0.2ml
GPR55 蛋白偶聯(lián)受體55抗體 0.2ml
Nox4/NADH NADPH氧化酶4抗體 0.1ml
Phospho-Rb(Ser795) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
AMFR/Gp78/RNF45 環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體 0.2ml
TSBP 特異蛋白抗體 0.2ml
ACA11 擬南芥ACA11抗體 1ml
TFE3 轉(zhuǎn)錄因子E3 0.1ml
RAIDD CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Pancreatic Amylase 胰淀粉酶抗體 0.1ml
TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
PTEN/MMAC1(CT) 一種腫瘤抑制基因抗體(C端) 0.1ml