詳細(xì)介紹
寨卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
寨卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
寨卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
5-溴-2-羥分子式:198.02分子量: C7H4BrNO英文名稱(chēng):5- bromo -2- hydroxy benzonitrileCAS號(hào):40530-18-5
6-氟-4-羥喹啉分子式:163.15分子量: C9H6FNO英文名稱(chēng):6- -4- hydroxy groupCAS號(hào):391-78-6
碳酸錳分子式:114.94分子量: MnCO3英文名稱(chēng):Manganese carbonateCAS號(hào):598-62-9
三乙硼四氫呋溶液分子式:97.99分子量: C6H15B英文名稱(chēng):Three ethyl boron solution in tetrahydrofuranCAS號(hào):97-94-9
4-(2-羥乙氧)砜分子式:338.37分子量: C16H18O6S英文名稱(chēng):4- (2- hydroxy group B) phenyl groupCAS號(hào):27205-03-4
吉馬酮英文名稱(chēng):GermacroneCAS號(hào):6902-91-6分子式:218.33458分子量:C15H22O
2-氟-5-甲酰三氟硼酸鉀分子式:分子量: C7H4BF4KO英文名稱(chēng):2- fluorine -5- Formylphenyl kbf4 threeCAS號(hào):1012868-70-0
2,7-二溴-9-咔唑分子式:401.1分子量: C18H11Br2N英文名稱(chēng):2,7- dibromo -9- phenyl carbazoleCAS號(hào):444796-09-2
6,7-二羥豆素英文名稱(chēng):6,7- two hydroxy groupCAS號(hào):305-01-1分子式:178.14分子量:C9H6O4
新銅試劑(2.9-二甲鄰非羅林)分子式:208.26分子量: C14H12N2英文名稱(chēng):The new copper reagent (2.9- two)CAS號(hào):484-11-7
N-氨丙啡啉分子式:144.21分子量: C7H16N2O英文名稱(chēng):N- aminopropyl morpholineCAS號(hào):123-00-2
寨卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌IFNAR1 干擾素α受體抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.5ml
BEX4 腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體 0.2ml
Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端) 0.1ml
CCDC69 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體 0.2ml
ARP4 肝血管生成素相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
DPOLA/DNA polymerase alpha DNA聚合酶α抗體 0.2ml
Proteasome 19S 10B 蛋白酶體PRS10B抗體 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.3ml
Mouse Anti-human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。