詳細介紹
反應五要素:
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
3-氯-5-硝三氟甲分子式:225.55分子量: C7H3ClF3NO2英文名稱:3- -5- nitro threeCAS號:401-93-4
4-硝吲唑分子式:163.13分子量: C7H5N3O2英文名稱:4- nitroindazoleCAS號:2942-40-7
二十三英文名稱:Twenty-three acidCAS號:2433-96-7分子式:354.61分子量: C23H46O2
1,3-二氟分子式:114.09分子量: C6H4F2英文名稱:Two - 1,3-CAS號:372-18-9
4-溴甲砜分子式:235.1分子量: C7H7BrO2S英文名稱:4- bromo methyl sulfoneCAS號:3466-32-8
1-異喹啉分子式:205.26分子量: C15H11N英文名稱:1- phenyl ISOCAS號:3297-72-1
2'--1,1',3',1''-三聯(lián)分子式:356.2分子量: C18H13I英文名稱:2'- -1,1', 3', 1''- threeCAS號:82777-09-1
4,8-二氯-2-三氯甲喹啉分子式:315.41分子量: C10H4Cl5N英文名稱:4,8- two -2- threeCAS號:93600-66-9
糠莫美他松英文名稱:Bran acid is not the United States he is pineCAS號:83919-23-7分子式:615.5分子量: C32H32Cl2O8
4,7-二溴-5-氟-2,1,3-并噻二唑分子式:311.95分子量: C6HBr2FN2S英文名稱:4,7- dibromo -5- fluoro -2,1,3- benzo thiadiazole was twoCAS號:1347736-74-6
派洛寧Y英文名稱:Luoning YCAS號:92-32-0分子式:302.81分子量: C17H19N2OCl
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測試劑盒方法NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體 0.1ml
IL-17RD 白介素17受體D抗體 0.1ml
CD8 alpha CD8抗體 0.1ml
Salmonella typhimurium O 傷寒沙門氏菌體蛋白O抗原抗體 0.2ml
phospho-DOK1(Tyr362) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml
CD44v6 CD44V6抗體 0.1ml
CD23/Fc EpsilonR II CD23抗體 0.2ml
C12orf23 第12號染色體開放閱讀框23抗體 0.2ml
Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml
IGF1R/CD221 胰島素樣生長因子I受體抗體 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的驢抗人IgG 0.1ml
NARG2 谷氨酸受體調節(jié)蛋白2抗體 0.2ml