詳細介紹
反應(yīng)五要素:
對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
白術(shù)內(nèi)酯I英文名稱:Atractylenolide ICAS號:73069-13-3分子式:230.30222分子量:C15H18O2
2-氯-6-三氟甲吡分子式:181.54分子量: C6H3ClF3N英文名稱:2- -6- threeCAS號:39890-95-4
2,2,4-*-2-硅代啡啉分子式:145.27分子量: C6H15NOSi英文名稱:2,2,4- three generation -2- silicon methyl morpholineCAS號:10196-49-3
3-羥異喹啉分子式:145.16分子量: C9H7NO英文名稱:3- hydroxy ISOCAS號:7651-81-2
2--5-溴-3-硝三氟甲分子式:分子量:英文名稱:2- amino -5- -3- nitro three fCAS號:157026-18-1
4--5-溴嘧分子式:174分子量: C4H4BrN3英文名稱:4- amino -5-CAS號:1439-10-7
紫杉英文名稱:TaxolCAS號:33069-62-4分子式:853.91分子量:C47H51NO14
2,7-二溴-9-正辛咔唑分子式:437.22分子量: C20H23Br2N英文名稱:2,7- dibromo -9- octyl carbazoleCAS號:726169-75-1
3--6-吡分子式:119.12分子量: C6H5N3英文名稱:3- amino -6- cyanopyridinesCAS號:55338-73-3
2,1,3-并硒二唑分子式:分子量: C6H4N2Se英文名稱:2,1,3- benzene and selenium twoCAS號:273-15-4
丙羥乙英文名稱:Allyl hydroxyethyl etherCAS號:111-45-5分子式:102.13分子量: C5H10O2
對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒圖片ACL6B/BAF53b 肌動蛋白樣蛋白6B抗體 0.2ml
BMP1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶抗體 0.2ml
Phospho-PRKACB(Thr198) 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體 0.1ml
14-3-3E/YWHAE 14-3-3E蛋白抗體 0.2ml
HLA-DR HLA-DR抗體 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Flightless 1 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 0.2ml
RAC1/MIG5 細胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 0.2ml
EBAG9/RCAS1 腫瘤相關(guān)表面抗原RCAS1抗體 0.2ml
Desmocollin 4 橋粒糖蛋白4抗體 0.2ml
CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2抗體 0.1ml
C1orf177 1號染色體開放閱讀框177抗體 0.2ml