詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
偏肺病毒(hMPV)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
偏肺病毒(hMPV)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
偏肺病毒(hMPV)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
綠原英文名稱:Lv YuansuanCAS號(hào):327-97-9分子式:354.30872分子量:C16H18O9
固紫醬GBC鹽英文名稱:GBC salt of solid purple sauceCAS號(hào):101-89-3分子式:334.35分子量: C14H14N4O4S
人參三英文名稱:Ginseng three alcoholCAS號(hào):32791-84-7分子式:476.73分子量: C30H52O4
8-羥-7-丙喹啉分子式:187.24分子量: C12H13NO英文名稱:8- hydroxy -7-CAS號(hào):58327-60-9
3-喹啉分子式:144.17分子量: C9H8N2英文名稱:3- amino groupCAS號(hào):580-17-6
間二甲分子式:106.16分子量: C8H10; C6H4(CH3)2英文名稱:Meta xyleneCAS號(hào):108-38-3
2,4-二氯硝分子式:192分子量: C6H3Cl2NO2英文名稱:2,4- twoCAS號(hào):611-06-3
2-氯-5-甲吡分子式:127.57分子量: C6H6ClN英文名稱:2- -5- methyl pyridineCAS號(hào):18368-64-4
去甲異波爾定英文名稱:NorisoboldineCAS號(hào):23599-69-1分子式:313.3511分子量:C18H19NO4
苦參堿英文名稱:MatrineCAS號(hào):519-02-8分子式:248.36分子量:C15H24N2O
亞鐵鉀分子式:422.39分子量: K4FeC6N6·3H2O英文名稱:Potassium ferrocyanideCAS號(hào):14459-95-1
偏肺病毒(hMPV)核酸檢測試劑盒圖片RIP2 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 0.2ml
NK-2R 神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體 0.1ml
phospho-B-Raf (Ser602) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體 0.2ml
HLC8/Lung cancer related protein 8 肺癌相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml
phospho-ALK/CD246(Tyr1604) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
Cullin 7 泛素連接酶CUL7蛋白抗體 0.2ml
FABP7/FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端) 0.1ml
Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙?;?/5/7抗體 0.1ml
NCF1 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體 0.2ml
IL-18R Beta/IL1R7/CD218b 白細(xì)胞介素-18受體β鏈抗體 0.2ml
Matrilin 1 軟骨基質(zhì)蛋白抗體 0.2ml