詳細介紹
反應(yīng)五要素:
志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
3-溴-4-氟三氟甲分子式:243分子量: C7H3BrF4英文名稱:3- -4- three fCAS號:68322-84-9
1,5-萘分子式:130.15分子量: C8H6N2英文名稱:1,5- naphthaleneCAS號:254-79-5
氯[1,3-雙(2,6-二異丙)咪唑-2-亞]銅(I)分子式:487.59分子量: C27H36ClCuN2英文名稱:氯[ 1,3 -雙(2,6-二異丙)咪唑- 2 -亞]銅(我)CAS號:578743-87-0
(4S)-2-[2-(二膦)]-4,5-二氫-5,5-二甲-4-(1-甲乙)-噁唑分子式:401.48分子量: C26H28NOP英文名稱:(4S) -2-[2- (two phenyl phosphine) phenyl]-4,5- methyl -4- two two hydrogen -5,5- (1- methyl ethyl) - oxazoleCAS號:1152313-76-2
生物素酰分子式:258.34分子量: C10H18N4O2S英文名稱:Bio - HydrazineCAS號:66640-86-6
漢防己甲素英文名稱:TetrandrineCAS號:518-34-3分子式:622.75分子量:C38H42N2O6
4-甲吡分子式:93.13分子量: C6H7N英文名稱:4- methyl pyridineCAS號:108-89-4
2,6-二甲-3,5-二溴吡分子式:264.94518分子量: C7H7Br2N英文名稱:2,6- two -3,5- dibromo methyl pyridineCAS號:
1-Boc-3-氨甲分子式:214.3分子量: C11H22N2O2英文名稱:1-Boc-3- ammonia methyl piperidineCAS號:162167-97-7
2,3,4,5-四氟硝分子式:195.07分子量: C6HF4NO2英文名稱:2,3,4,5- PTFE nitrobenzeneCAS號:5580-79-0
泛昔洛韋英文名稱:FamciclovirCAS號:104227-87-4分子式:321.33分子量: C14H19N5O4
志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒圖片IGSF6 免疫球蛋白超家族成員6抗體 0.2ml
ASB17 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體 0.2ml
ECHS1 烯脂酰輔酶A水解酶抗體 0.1ml
phospho-STAT5a(Ser726) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 0.1ml
phospho-PARK2(Ser101) 磷酸化帕金蛋白抗體 0.1ml
TPSB2 肥大細胞類胰蛋白酶β2 0.1ml
HDAC5 組蛋白去乙酰化酶5抗體 0.1ml
DDIT4L DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 0.2ml
TSPAN16/TM4-B 四分子交聯(lián)體16抗體(四旋蛋白) 0.2ml
AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗體 0.1ml
Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 0.1ml
CRP C-反應(yīng)蛋白抗體 0.1ml