詳細(xì)介紹
轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
非那雄胺英文名稱:Non that maleCAS號:98319-26-7分子式:372.54分子量: C23H36N2O2
3-Boc-氨甲分子式:214.3分子量: C11H22N2O2英文名稱:3-Boc- ammonia methyl piperidineCAS號:142643-29-6
聚(L-乳酸鈷-己內(nèi)酯-乙交酯鈷)分子式:分子量:英文名稱:Poly (L- lactic acid co caprolactone co glycolide)CAS號:134490-19-0
硝分子式:123.11分子量: C6H5NO2英文名稱:NitrobenzeneCAS號:98-95-3
聚合氯鋁分子式:79.44分子量: AlClHO英文名稱:Polymeric aluminium chlorideCAS號:1327-41-9
甲藍(lán)英文名稱:Toluene blueCAS號:18197-26-7分子式:95.03分子量: C2H2NNaO2; (HCO)2NNa
4-(2-酮酸-1-并咪唑)分子式:217.27分子量: C12H15N3O英文名稱:4- (2- keto -1- benzimidazole) piperidineCAS號:20662-53-7
6--1-甲脲嘧分子式:141.13分子量: C5H7N3O2英文名稱:6- amino -1-CAS號:2434-53-9
5-溴-2-氯三氟甲分子式:259.45分子量: C7H3BrClF3英文名稱:5- -2- three fCAS號:445-01-2
1-乙氧萘分子式:172.22分子量: C12H12O英文名稱:1- ethyl naphthaleneCAS號:1252060
1,2,3,4-四萘分子式:432.55分子量: C34H24英文名稱:1,2,3,4- four phenyl naphthaleneCAS號:751-38-2
轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒圖片Goat Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
TNFRSF13B 腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體 0.2ml
Plasminogen 纖維蛋白溶酶原抗體 0.1ml
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 0.1ml
E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
CD328/Siglec-7 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素7抗體 0.2ml
ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶抗體 0.2ml
Trypsin Inhibitor/CRISP8 胰蛋白酶抑制劑抗體 0.2ml
TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑抗體 0.1ml
PAX7 配對盒基因7抗體 0.2ml
phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。