轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒方法	48T	PCR檢測(cè)試劑盒

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

5-羥-1-甲-3-三氟甲-1H-吡唑分子式：166.1分子量： C5H5F3N2O英文名稱：5- hydroxy -1- methyl -3- three -1H-CAS號(hào)：122431-37-2

1-(4-甲氧)乙炔-4-正戊分子式：278.39分子量： C20H22O英文名稱：1- (4-, -4-) - based acetylene - based acetylene groupCAS號(hào)：39969-28-3

2,6-二溴-1,4-二胺分子式：265.94分子量： C6H6Br2N2英文名稱：-1,4- two 2,6- dibromo benzene amineCAS號(hào)：29213-03-4

硫劑HVA-2（PDM）英文名稱：HVA-2 (PDM)CAS號(hào)：3006-93-7分子式：268.23分子量： C14H8N2O4

玫瑰紅鈉英文名稱：Rose redCAS號(hào)：523-21-7分子式：214.04分子量： C6Na2O6

鉬粉分子式：95.94分子量： Mo英文名稱：Molybdenum powderCAS號(hào)： 7439-98-7

甲酸鉀分子式：160.22分子量： C7H5kO2英文名稱：Potassium benzoateCAS號(hào)：582-25-2

二氫楊梅素英文名稱：Two HCAS號(hào)：27200-12-0分子式：320.25分子量：C15H12O8

異丁酰分子式：102.14分子量： C4H10N2O英文名稱：Iso butyl hydrazineCAS號(hào)：3619-17-8

聚偏氯乙膠乳英文名稱：Polyvinyl chloride latexCAS號(hào)：分子式： C6H8N3O2R分子量：

4-乙三氟硼酸鉀分子式：210.046分子量： C8H7BF3.K英文名稱：4- vinyl phenyl kbf4 threeCAS號(hào)：705254-32-6

轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒方法SH3TC2  脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體 0.2ml

RING5  環(huán)指蛋白5抗體（E3泛素蛋白連接酶RNF5） 0.2ml

C20orf196  20號(hào)染色體開放閱讀框196抗體 0.2ml

ADAR1 (N-terminus)  雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） 0.2ml

CRIM1  富含半胱氨酸運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體 0.1ml

PAR-2  蛋白酶激活受體-2抗體 0.1ml

Phospho-Lyn (Tyr497)  磷酸化膜相關(guān)蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體 0.1ml

IL-16  白介素16抗體 0.1ml

SEMA4D/CD100  臂板蛋白4D抗體 0.2ml

C12ORF63  12號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 0.2ml

SHC3  SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 0.2ml

MID1/Midline-1/RNF59  環(huán)指蛋白59抗體 0.2ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。