詳細(xì)介紹
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
3,4-二羥酰分子式:168.15分子量: C7H8N2O3英文名稱:3,4- two hydroxy phenyl hydrazineCAS號:39635-11-5
1-(3-)鹽鹽英文名稱:1- (3- chlorophenyl) piperazine hydrochlorideCAS號:13078-15-4分子式:233.14分子量: C10H14Cl2N2
1,2-雙-2,5-二異丙磷分子式:418.58分子量: C26H44P2英文名稱:1,2- bis -2,5- twoCAS號:136705-65-2
R-甲吡分子式:分子量:英文名稱:R- methyl pyridineCAS號:
2-二砜分子式:233分子量: C12H11NO2S英文名稱:2- two phenyl groupCAS號:4273-98-7
2,6-二甲氧吡分子式:139.15分子量: C7H9NO2英文名稱:2,6- two aCAS號:6231-18-1
葫蘆素英文名稱:GourdCAS號:7257-29-6分子式:分子量:
4-溴-3-羥甲吡分子式:分子量: C6H6BrNO英文名稱:4- bromide -3-CAS號:197007-87-7
蒼術(shù)素英文名稱:AtractylodinCAS號:55290-63-6分子式:182.22分子量:C13H10O
1-(4-硝芐)咪唑分子式:203.2分子量: C10H9N3O2英文名稱:1- (4- nitro group)CAS號:18994-90-6
2-羥-4-甲喹啉分子式:159.18分子量: C10H9NO英文名稱:2- hydroxy -4- methyl groupCAS號:607-66-9
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測試劑盒圖片phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗體 0.1ml
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體 1ml
Gas1 生長休止特定蛋白1抗體 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
Phospho-TrkA (Ser791) 磷酸化酪氨酸激酶A抗體 0.1ml
Ankyrin erythroid 紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體 0.2ml
BRD7 鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
NFKB p65 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
phospho-JNK1/2/3(Thr183+Thr185) 磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體 0.1ml
GDF3 生長分化因子3抗體 0.1ml
KMT8/Riz1/Riz2 轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。