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交叉反應：Human, Mouse, Rat, Rabbit  

商品介紹：

規(guī)格：50ul  100ul 200ul

產品分類：抗體 / 一抗

中文名稱 拓普西異構酶Ⅰ抗體

英文別名 DNA topoisomerase 1; DNA topoisomerase I; NUP98 fusion e; TOP 1; TOP I;_HUMAN; TOPI; Topoisomerase 1; Topoisomerase1; TopoisomeraseI; Type I DNA topoisomerase.

標記： Unconjugated

抗體來源： Rabbit

抗體類型： Polyclonal

免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Topoisomerase I

蛋白細胞定位： 細胞核

純化方法： affinity purified by Protein A

亞型 IgG

性狀： Liquid

濃度： 1mg/ml

儲存液： 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件： Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

背景資料： This e encodes a DNA topoisomerase, an enzyme that controls and alters the topologic states of DNA during transcription. This enzyme catalyzes the transient breaking and rejoining of a single strand of DNA which allows the strands to pass through one another, thus altering the topology of DNA. This e is localized to chromosome 20 and has pseudoes which reside on chromosomes 1 and 22. [provided by RefSeq, Jul 2008]

抗體的制備過程：

1. 免疫原的制備

普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物

常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定

得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存

建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性：

(1)結合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應?？贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。

(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。

(3)結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。

(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。

一抗和二抗的區(qū)別：

第一抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結合。

第二抗體是能和抗體結合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。

一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說，抗原進入機體刺激機體免疫系統產生免疫應答，由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質。

一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團，而且一抗可以至少結合兩種其他基團（底物和二抗）。

一抗：可以特異結合底物，就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。

二抗：可以和一抗結合，并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），則不需要二抗。但這樣成本很高，因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記，再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣，當一抗結合到底物上，就可以通過二抗檢測出來。

抗原抗體反應影響因素：

（一）反應物自身的因素

抗體：不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應.

抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果.顆粒性抗原出現凝集反應,可溶性抗原出現沉淀反應,單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象.

（二）反應環(huán)境條件

酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的pH環(huán)境中進行.蛋白質具有兩性電離性質,因此每種蛋白質都有固定的等電點.抗原抗體反應一般在pH6～9進行,有補體參與的反應pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應.

溫度：在一定范圍內,溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速.一般為15℃～40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其的最適反應溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應.

電解質：抗原與抗體發(fā)生特異性結合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質參加,仍不出現可見反應.為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.

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