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Millipore超濾離心管操作步驟
一、Millipore密理博超濾離心管0.5ml簡(jiǎn)介
Millipore密理博超濾離心管0.5ml,即Amicon@Ultra-0.5超濾離心管,具有快速超濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù),輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,獲得較高的樣本回收率(通常>90%),并達(dá)到30倍的濃縮。根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時(shí)間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;過(guò)濾管的死體積設(shè)計(jì)能有效防止過(guò)度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。Amicon@Ultra-0.5超濾管未經(jīng)消毒,僅供一次使用。
Amicon UItra-0.5產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值,NMWL)。這些超濾管僅供研究使用,不適用于診斷程序。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
UFC503096 | 96個(gè)/箱 | |
UFC501024 | 24個(gè)/箱 | |
UFC510096 | 96個(gè)/箱 |
二、Millipore密理博超濾離心管0.5ml操作步驟
1. 預(yù)清洗
Amicon Ultra-0.5超濾管的超濾膜含有痕量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1 N NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行二次清洗。
注意:Amicon Ultra超濾離心管中的濾膜一旦潤(rùn)濕后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。
2. 操作
(1)將Amicon Ultra-0.5超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。
(2)向Amicon Ultra內(nèi)管中加入不超過(guò)500 μL的樣本,并蓋上蓋子。
(3)將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中央;用一個(gè)類似的超濾管平衡。
(4)以14,000×g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。
(5)離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。
(6)為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過(guò)來(lái)插在一個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開(kāi)的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中央;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1,000×g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。
說(shuō)明:要達(dá)到理想的回收效果,請(qǐng)盡早進(jìn)行倒置離心。