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原理

轉(zhuǎn)化細(xì)胞由于不同的蛋白質(zhì)分子所帶的堿性和酸性基團(tuán)的數(shù)目不同，在pH值不同的溶液中，蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理?xiàng)l件下，整個(gè)蛋白質(zhì)所帶負(fù)電荷多，則為酸性蛋白質(zhì)；帶正電荷多，則為堿性蛋白質(zhì)。據(jù)此，可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處理提出核酸后，用不同pH值的固綠染液分別染色，細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白質(zhì)顯示出來(lái)。

轉(zhuǎn)化細(xì)胞方法

1．以破壞脊髓法處死蟾蜍，將其腹面向上放人蠟盤(pán)中，剪開(kāi)胸腔，打開(kāi)心包。小心將心臟剪一小口，取心臟血一滴滴在干凈載玻片一端，推片，按此法制備二張血涂片，室溫晾干。

2. 將涂片作好標(biāo)記放在70％乙醇中固定5分鐘，室溫晾干。

3．放入5％三氯醋酸中60℃30分鐘，抽提出核酸。

4．清水沖洗多次（3分鐘以上），以沖去痕跡的三氯醋酸。

5．濾紙吸干玻片上水分。

6. 一張片放入0.1％堿性固綠(pH8.0～8.5)中染色10～15分鐘,另一張片放入0.1％酸性固綠(pH2.0～2.5)染色5～10分鐘。

7．清水沖洗，蓋上蓋片鏡檢。

轉(zhuǎn)化細(xì)胞結(jié)果經(jīng)堿性固綠染色片中，胞質(zhì)、核仁不著色，細(xì)胞核大部分被染成綠色，是為堿性蛋白質(zhì)存在處。經(jīng)酸性固綠染色片中，因胞質(zhì)和核仁中有酸性蛋白，被染成綠色。