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轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)24 h, 采用ELISA、qRT-PCR、免疫細(xì)胞熒光染色和Western blot等方法檢測(cè)HH信號(hào)相關(guān)分子(Ptch1、Smo和Gli1)、TGF-β1、EMT相關(guān)分子(Rac1蛋白、肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志物α-SMA和上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-cadherin)、III型膠原mRNA或蛋白的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn), 外源性Shh上調(diào)Smo和Gli1表達(dá), 抑制Ptch1表達(dá), 繼而激活HH信號(hào); HH信號(hào)活化抑制腎小管上皮細(xì)胞E-cadherin的表達(dá), 上調(diào)α-SMA、III型膠原和TGF-β1的表達(dá)。環(huán)靶明干預(yù)后, Smo表達(dá)下調(diào), 進(jìn)而抑
制HH信號(hào)、EMT和膠原累積, 并下調(diào)TGF-β1的表達(dá)。應(yīng)用TGF-β1誘導(dǎo)小管上皮細(xì)胞EMT, 同時(shí)也上調(diào)HH信號(hào)分子Smo和Gli1的表達(dá), 下調(diào)Ptch1的表達(dá), 提示TGF-β1可誘導(dǎo)HH信號(hào)活化。綜上所述,HH信號(hào)和TGF-β1均參與了腎小管上皮細(xì)胞EMT和膠原累積過(guò)程。HH信號(hào)活化可促進(jìn)TGF-β1的表達(dá), 同時(shí)TGF-β1能激活HH信號(hào), 推測(cè)TGF-β1與HH信號(hào)可能存在交叉對(duì)話以調(diào)控EMT和膠原累積。

Hedgehog-Gli1(HH)信號(hào)通路是一條進(jìn)化保守的、與轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖分化密切相關(guān)的信號(hào)通路。正常表達(dá)的HH信號(hào)在人類(lèi)發(fā)育過(guò)程中起著重要作用, 但持續(xù)異常激活的HH信號(hào)可導(dǎo)致胰腺癌和胃癌等多種腫瘤的發(fā)生。zui近研究發(fā)現(xiàn), HH信號(hào)活化與組織纖維化的發(fā)生密切相關(guān)。我們前期的研究結(jié)果顯示, 輸尿管梗阻或者馬兜鈴酸誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)累積過(guò)程中, HH信號(hào)均存在不同程度的活化, 同時(shí)伴有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGF-β1的高表達(dá)。但HH信號(hào)與TGF-β1之間的相互關(guān)系及影響EMT和ECM累積的分子機(jī)制目前尚不清楚。本研究分別通過(guò)外源性重組蛋白活化HH信號(hào)和誘導(dǎo)TGF-β1高表達(dá), 并進(jìn)行藥物干預(yù), 以觀察兩者間的對(duì)話, 評(píng)價(jià)其對(duì)EMT和ECM累積的影響。
UV法含量測(cè)定    100mg    100777-200401    醋氯芬酸
HPLC法含量測(cè)定    100mg    100778-200501    唑來(lái)膦酸
含量測(cè)定    100mg    100780-200801    鹽酸非那吡啶 
檢查用    50mg    100781-200501    格列美脲雜質(zhì)1（4-[2-（3-乙基-2-氧-吡珞啉-1-甲酰胺基）乙基]苯
含量測(cè)定    100mg    100782-200401    鹽酸阿扎司瓊 
檢查    50mg    100783-200401    鹽酸普萘洛爾
轉(zhuǎn)化細(xì)胞