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          轉(zhuǎn)化細(xì)胞迅速解凍方法

          閱讀:411          發(fā)布時(shí)間:2017-12-28

          轉(zhuǎn)化細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
          實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
          1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
          2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
          3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
          迅速解凍:
          1.    迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化,時(shí)間控制在1分鐘左右
          離心去除凍存液:
          1.  融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中,2000r/min 或者600g離心2min
          2.  吸棄上清液。
          3.  用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,吹打制成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
          4.  將復(fù)蘇好的轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi),8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞生長情況而定。
          lv丹(工業(yè)級(jí)混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品    1000mg/L于己烷,1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-04-5PAK    1000mg/L于丙酮,5 x 1ml
          2-溴丙suan    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-04    1000mg/L于丙酮,1ml
          敵草快    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-03    1000mg/L于乙suan乙酯,1ml
          甲基毒死蜱    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-01    1000mg/L于甲醇,1ml
          四lv對(duì)苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品    50mg/L于甲醇,1ml    丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031003-05    100mg/L于甲醇,1ml
          四lv對(duì)苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品    200mg/L于叔丁基甲mi,1ml    丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031003-03-5PAK    100mg/L于叔丁基甲mi,5 x 1ml
          轉(zhuǎn)化細(xì)胞

           

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