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轉(zhuǎn)化細(xì)胞迅速解凍方法
閱讀:411 發(fā)布時(shí)間:2017-12-28轉(zhuǎn)化細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
迅速解凍:
1. 迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化,時(shí)間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液:
1. 融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中,2000r/min 或者600g離心2min
2. 吸棄上清液。
3. 用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,吹打制成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
4. 將復(fù)蘇好的轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi),8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞生長情況而定。
lv丹(工業(yè)級(jí)混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 1000mg/L于己烷,1ml 嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031004-04-5PAK 1000mg/L于丙酮,5 x 1ml
2-溴丙suan 1000mg/L;1ml 嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031004-04 1000mg/L于丙酮,1ml
敵草快 1000mg/L;1ml 嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031004-03 1000mg/L于乙suan乙酯,1ml
甲基毒死蜱 1000mg/L;1ml 嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031004-01 1000mg/L于甲醇,1ml
四lv對(duì)苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品 50mg/L于甲醇,1ml 丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031003-05 100mg/L于甲醇,1ml
四lv對(duì)苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品 200mg/L于叔丁基甲mi,1ml 丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031003-03-5PAK 100mg/L于叔丁基甲mi,5 x 1ml
轉(zhuǎn)化細(xì)胞