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          技術(shù)文章

          誰動了你的轉(zhuǎn)化細胞?

          閱讀:257          發(fā)布時間:2018-4-10

          當(dāng)我們在養(yǎng)轉(zhuǎn)化細胞的時候,有可能會出現(xiàn)如下的狀況:
           
          細胞生長緩慢
          細胞變形
          碎片增加
          懸浮細胞容易成團
          培養(yǎng)基提前變色
          鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點

          如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細胞株老化、細菌污染等原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細胞可能出現(xiàn)了支原體污染。

          污染的支原體在顯微鏡下無法看到,但它對細胞危害卻很大。它使細胞狀態(tài)不佳,生長速度慢,同時 DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變,嚴(yán)重影響實驗結(jié)果,造成實驗數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確和時間精力的浪費。

          下面小編給你介紹一款有效預(yù)防和祛除支原體的神器ZellShieldTM,希望能對你的實驗有所幫助。事實上許多培養(yǎng)細胞的老師和學(xué)生都在用它了。

          ZellShieldTM是一種即用型高濃度新型復(fù)合抗生素,無細胞毒性。它通過阻止DNA及蛋白的合成,有效地祛除細胞培養(yǎng)中支原體、細菌、真菌、酵母污染。因此使用ZellShield®時,不需再使用鏈青霉素。

          如果你懷疑細胞發(fā)生支原體污染,可采取如下步驟進行支原體的祛除。

          *步:先把細胞消化下來,放入離心管,懸浮沖洗,離心,棄上清,反復(fù)三次。此時可將細胞上大部分的支原體去除。

          第二步:加入含1%的ZellShieldTM的新鮮培養(yǎng)液,細胞進行正常培養(yǎng)。新的支原體增殖受到抑制,舊的支原體隨著轉(zhuǎn)化細胞的換液逐步減少,通過4代左右的培養(yǎng),細胞中的支原體基本可被*清除。

          ZellShieldTM平常是在-18℃保存。在與培養(yǎng)基混合后2-8℃儲存可放一個月時間。濃度配比為1%。你也來試試吧。
              553/380fmol    150001-    游離甲狀腺素
              552/362fmol    150002-    游離三碘甲狀腺原氨酸
          效價測定    約2.5g    501-8004    洋地黃
          效價測定    約30mg    502-8709    垂體后葉
          效價測定    20mg/支    504-8708    胰島素(豬)
          效價測定    20mg/支    150505-9609    豬胰島素(高純〕
          效價測定    約2.5g    150506-8906    葡萄糖酸銻鈉
          檢查用    25mg/支    150510-200412    磷酸組胺
          效價測定    60IU/支    150513-200409    絨促性素
          效價測定    20mg/支    150514-870405    毒毛旋花子苷G
          試劑盒測試    2.2μg/支    523-8901    豬胰島素原
          轉(zhuǎn)化細胞

           

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