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          裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒?操作步驟:

          閱讀:145          發(fā)布時間:2022-2-24

          裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒操作步驟:


          1.         標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。


          2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


          3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


          4.         配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。


          5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。


          6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。


          7.         溫育:操作同3。


          8.         洗滌:操作同5。


          9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


          10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


          11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

          ATG9B自噬相關蛋白9B抗體

          Apg12自噬相關蛋白12抗體

          ATG13自噬相關蛋白13抗體

          ATG3自噬相關蛋白3抗體

          ADAMTS4整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體

          phospho-ATF2 (Ser490/498)磷酸化活化復制因子2抗體

          phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

          ACTR絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體

          ADAM18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

          ATF6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

          AP2 beta銜接蛋白β抗體

          Gamma-Adaptin銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

          AQP9水通道蛋白-9抗體

          Annexin A3膜粘連蛋白A3抗體

          Annexin IV膜粘連蛋白 A4抗體

          APG8A自噬相關蛋白8A抗體

          phospho-Akt (Thr450)磷酸化蛋白激酶B抗體

          phospho-AMPK alpha-1 (Thr198)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

          phospho-Akt(Thr308)磷酸化蛋白激酶B抗體

          APOBEC3G脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體

          AKAP13蛋白激酶錨定蛋白13抗體


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