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多能干細胞能地轉化為想要的靶向細胞
閱讀:279 發(fā)布時間:2017-6-23科學家們利用多能干細胞進行研究所面臨的zui大困難之一就是無法直接利用這些細胞進行研究,因為通過成體或胚胎細胞誘導產(chǎn)生的多能干細胞通過接受一定的化學信號從一種干細胞轉變成為功能性細胞,過去研究人員將DNA插入到多能干細胞中促進其誘導轉化,往往會剩下插入的DNA殘留物,因此并不清楚多能干細胞是否能地轉化為想要的靶向細胞。
研究者指出,在該研究中,他們并沒有摻入“告訴”細胞發(fā)生轉化的DNA片段,但當利用藍光照明時,DNA就能夠促進細胞發(fā)綠光,這種標志物幫助研究人員觀察到摻入到細胞中的DNA質粒,從而控制細胞中基因的表達。此前研究者所開發(fā)的方法能夠摻入合適的DNA來開啟干細胞的轉化過程,但并不能*移除所插入的DNA。
這項研究中,研究人員利用了一種新型系統(tǒng)(Tet-On 3G inducible PiggyBac),該系統(tǒng)能夠完成XLone質粒的插入、激活以及移除等過程,系統(tǒng)的PiggyBac部分包括了將DNA插入細胞DNA的過程,而Tet-On3G部分則包括了必要的信號信息,同時這種新型系統(tǒng)還能夠使得細胞對多西環(huán)素更加敏感(一種能夠開啟細胞發(fā)生轉化的藥物)。
在利用大量多個拷貝的質粒來增加其進入細胞的可能性的同時,該系統(tǒng)還檢測了其是否能夠按照預期來發(fā)揮作用;如果僅有一個或少量的質粒被插入到了細胞中,新的DNA就會被沉默,插入多個質粒就能夠確保至少有一個發(fā)揮作用。
因此,新型系統(tǒng)能夠確保不會發(fā)生任何表達泄露(leakage expression)。這套系統(tǒng)的第二個優(yōu)勢在于,一旦細胞被“再”成為心臟細胞或神經(jīng)細胞,質粒就會從細胞中被移除,而且在沒有任何質粒系統(tǒng)殘留物的前提下干細胞還會繼續(xù)進行過程。