詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
E2/UBCE泛素結(jié)合酶ELISA Kit | E2/UBCE ELISA Kit | GOY-E98798 |
檢測(cè)目的:用于檢測(cè)血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
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性能:
1) 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4) 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個(gè)月
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
人蛋白酪氨酸磷酸酶受體O(PTPRO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit
人P27蛋白(P27)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human P27 (P27 Protein) ELISA Kit
人腫瘤蛋白P53(TP53)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit
人Podocin蛋白(PDCN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PDCN (Podocin) ELISA Kit
人Pdgfa相關(guān)蛋白(PDAP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit
人Preptin 蛋白(Preptin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human Preptin ELISA Kit
人胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit
人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-GP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit
人P選擇素(SELP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SELP (P-Selectin) ELISA Kit
人Rap鳥嘌呤交換因子1(RAPGEF1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit
人Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human Rac-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RHOB (Ras Homolog Gene Family, Memmber B) ELISA Kit
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit
人ras同源物基因家族成員a(RHOA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit
E2/UBCE泛素結(jié)合酶ELISA Kit山柰酚-3-O-蕓香糖苷 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷 CAS 5041-82-7 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
草烏甲素 CAS 107668-79-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
升醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
果糖 CAS 7660-25-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
柴胡皂苷B2 CAS 58316-41-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
D-(-)-奎寧酸 CAS 77-95-2 規(guī)格: ≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
銀杏內(nèi)酯B CAS 15291-77-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
青藤堿 CAS 115-53-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
黃芪總皂苷 CAS 17429-69-5 規(guī)格: UV≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
綠原酸 CAS 327-97-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
羅紅 CAS 80214-83-1 規(guī)格: 200mg 訂購(gòu)|咨詢
丙氨酸 CAS 338-69-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
茯苓總酸(鑒別用) CAS 29070-92-6 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢