番紅O-固綠植物組織染色液公司*的產(chǎn)品：NF-L/PE 熒光PE標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG葡萄糖 高純級(jí)，≥99.5% (GC)
NF-M/FITC 熒光標(biāo)記中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG葡萄糖 和昆蟲培養(yǎng)級(jí), ≥99.5%
NF-κBp50/FITC 熒光標(biāo)記核因子50/κ因結(jié)合核因子50抗體IgG葡萄糖 植物培養(yǎng)級(jí), ≥99.5%
Phospho-NF-KappaB p10

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：番紅O-固綠植物組織染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

黑色淺灰鏈霉菌血管生成樣蛋白4抗體Human KCNIP1 ELISA Kit小鼠葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒

弗吉尼亞鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體Human KCTD14 ELISA Kit小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒

鐮刀菌嘌呤嘧啶核內(nèi)切2抗體Human KCNIP3 ELISA Kit小鼠破骨分化因子(ODF)免疫試劑盒

根瘤菌神經(jīng)絲蛋白抗體Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠蘋果脫氫(MDH)免疫試劑盒

污黑腐皮殼β淀粉樣肽（1-28）抗體Human KCNAB1 ELISA Kit小鼠嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒

銹色桿孢囊菌有絲分裂激B抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

灰葡萄孢（灰霉病菌）軟骨蛋白聚糖抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

毛榛畢赤酵母去整合樣金屬蛋白10抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒

釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體Human KCNE1 ELISA Kit小鼠凝血因子XIII B(F13B)免疫試劑盒

蠟?zāi)俸^蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體Human KCNE4 ELISA Kit小鼠凝血因子XIII A1(F13A1)免疫試劑盒

釀酒酵母植物生長(zhǎng)激ABP1抗體Human KARS ELISA Kit小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human KCNF1 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）α紅分化相關(guān)因子抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅺ(FⅪ)免疫試劑盒

葡萄鏈格孢*血管緊張激活蛋白1抗體Human KCNG4 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒

焦曲霉Alpha清蛋白抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)免疫試劑盒

粘質(zhì)沙雷氏菌AFAP1L2抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)免疫試劑盒

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí)白介28A試劑盒烏藥環(huán)戊烯二

球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格：>99%，分子生物學(xué)級(jí)白介26試劑盒烏藥環(huán)戊烯二

馬杜拉放線菌Actinomadura│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級(jí)白介25試劑盒無梗五加苷B
番紅O-固綠植物組織染色液油菜假單胞 2-氨基-5-溴-3-硝基吡啶利鈉肽受體BElisa

弗蘭克氏 2-溴-4-硝基吡啶白抗原G5Elisa

腐皮殼 苯硅烷Smad同源物3Elisa

短短芽胞桿 1,3-二甲基吡唑Smad同源物4Elisa

洋蔥青霉 1,5-二甲基-1H-吡唑Smad同源物6Elisa

新疆鹽紅 2-溴-5-氟甲酯Smad同源物7Elisa

耐林丹黃桿 2-溴-5-氨基甲酯嘌呤能受體P2X7Elisa

熒光假單胞 4-溴鄰苯二甲酰亞酪氨酸激受體Elisa

腐皮鐮孢 4--2,6-二氟苯P物質(zhì)受體Elisa

枯草芽孢桿 3-溴苯酞抗SSA IgG抗體Elisa

東方伊薩酵母 4-溴-1,3-苯二甲酸抗SSB IgG抗體Elisa

萊比托游動(dòng)球 N-叔丁基甘氨酸 鹽酸鹽谷氨酰?；h(huán)化Elisa

熱帶假絲酵母 5-甲氧基-2-巰基-4-嘧啶肌酸激同工MBElisa

中山乳芽胞桿中山亞種 己酸芐酯肽基脯氨酰順反式異構(gòu)NIMA相互作用蛋白1Elisa

猴頭 1-溴-2,4-二甲基-5-（易）腫瘤壞死因子受體超家族成員11AElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)