產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):SGK1抑制劑(EMD638683 S-Form)
英文名稱(chēng):EMD638683 S-Form
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
EMD638683(S-Form)是SGK1抑制劑,IC50>300nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1184940-46-2 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:364.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
浸麻類(lèi)芽孢桿菌絲羧甲半胱合成抗體Human SF3A3 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體Human SF3A2 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫試劑盒
腐皮鐮孢磷化荷爾蒙敏感脂肪抗體Human SF3B14 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒
微枝形桿菌組蛋白去乙?;?/span>1抗體Human HYAL3(Hyaluronidase-3) ELISA Kit大鼠17-類(lèi)固(17-KS)免疫試劑盒
釀酒酵母半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體Human SF3B4 ELISA Kit大鼠17-羥孕烯免疫試劑盒
小果豆包菌磷化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)Human SF3B2 ELISA Kit大鼠17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒
惡臭假單胞菌異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)Human SF3B3 ELISA Kit大鼠17羥皮質(zhì)類(lèi)固(17-OHCS)免疫試劑盒
噬果膠黃桿菌缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體Human SF3B5 ELISA Kit大鼠17-α甲睪(17-αMT)免疫試劑盒
釀酒酵母甲型流感病M2抗體Human SFT2D3 ELISA Kit大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)免疫試劑盒
頂青霉熱休克蛋白-47抗體Human SFXN1 ELISA Kit大鼠12羥二十烷四烯(12-HETE)免疫試劑盒
梨紅菇人類(lèi)狀瘤病16抗體Human SFXN2 ELISA Kit大鼠11β羥類(lèi)固脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒
環(huán)狀芽孢桿菌缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1αHuman SFXN3 ELISA Kit大鼠1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒
瑟氏泰勒蟲(chóng)(寧縣株)組蛋白H3抗體Human BCO2(Beta,beta-carotene 9′,10′-oxygenase) ELISA Kit大鼠1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD glucosidase)免疫試劑盒
魯氏接合酵母人類(lèi)皰疹病8抗體/皰疹病8型Human SGCE ELISA Kit大鼠1,25-二羥維生D(3)24-羥化,線(xiàn)粒體(CYP24A1)免疫試劑盒
食環(huán)氧化物交替紅色桿菌人類(lèi)巨病抗體Human SGF29 ELISA Kit大鼠1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌人類(lèi)皰疹病8抗體Human SGCG ELISA Kit大鼠 SCUBE1 免疫試劑盒
強(qiáng)酒海桿菌Marinobacter│vinifirmus 質(zhì)量規(guī)格:1.00mg/ml比枯枯靈
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%高良姜
黃須腹菌Rhizopogon│luteolus Fr. 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%奇任
SGK1抑制劑(EMD638683 S-Form)Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體6--2-硫代尿嘧啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體六酮 99%
phospho-BAD(Ser128) 化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體六烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-BAD(Ser75/99/118) 化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體1-庚烯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
Bag1/RAP46 抑凋亡因bag1抗體六苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Bak Bcl-2同源拮抗劑抗體六苯標(biāo)準(zhǔn)溶液,52.6mg/L,溶劑:
BADH2 BADH2抗體(水稻)4-羥三苯氧 98%
Bassoon 鋅指蛋白231抗體4-羥三苯氧 98%(Z:E=7:1)
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)