以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
髓鞘染色液(固綠法) |
| 3×50ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 髓鞘染色,石蠟切片 注意事項: 染色結(jié)果為:髓鞘呈深綠色,脫髓鞘纖維不著色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽番茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chlorprothixene孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體包裝25g
鹽黃柏堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imidazole鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體包裝5g
鹽黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RetapamulinP物質(zhì)受體抗體包裝25g
鹽毛果蕓香堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lactulose神經(jīng)激肽B受體抗體包裝5g
鹽青藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FTIBAMZONE腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體包裝5g
鹽去氫駱駝蓬堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhapontin腫瘤抑制基因抗體包裝25g
鹽石蒜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzhexol hydrochloride腫瘤抑制基因抗體包裝5g
鹽甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Folic acid孤菲肽/痛敏肽抗體包裝100g
鹽小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium gluconate軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體包裝25g
鹽小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pyran pamoate神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體包裝1g
鹽藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pamoic acid性受體NK-p46抗體包裝5g
鹽伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenolphthalein神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
鹽益母草堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VanillinNYS48蛋白抗體包裝1g
鹽育亨賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciclopirox肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體包裝250mg
羊膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciclopirox非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白2抗體包裝1g
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)核菌桿抗體IgG試劑盒重樓皂苷I;Chonglou Sapon
普通赤細(xì)菌Erythrobacter│vulgaris 質(zhì)量規(guī)格:>99%,培養(yǎng)級結(jié)核菌桿試劑盒粗莖;Crassicauline
ATCC35666資源名稱: 停乳鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,BR結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白試劑盒橙黃Ⅳ;Orange IV
髓鞘染色液(固綠法)宇佐美曲霉 6--2,3-二色P4502E1Elisa
熱栗色鏈霉 4-(2,4-二苯氧基)色P450c21A;21-羥化Elisa
玉米黑粉 2,6-二溴苯并噻唑色P450c21B;21-羥化Elisa
峨眉山鏈霉 6-(2,3-Dimethyl-5-sulfo-3H-indol-3-yl)hexanoic aci色氧化4Elisa
球孢白僵 L-O-磷酸絲氨酸外信號調(diào)節(jié)激Elisa
枯草芽孢桿 3-氟-5-周期D1Elisa
暗黃紫鏈霉 3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸纖連蛋白Elisa
枯草芽孢桿 3-三氟甲基-2-吡啶甲纖溶原激活物抑制因子1Elisa
淺紫灰鏈霉產(chǎn)色變種 2,3,5-三異煙酸纖維蛋白原Elisa
佛羅里達(dá)側(cè)耳 4-溴-2,3-二氟苯甲煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
溶血 對溴苯酸乙酯?;趸疎lisa
雅致小克銀漢霉 GW3965 鹽酸鹽線粒體核糖體蛋白S11Elisa
馬爾他布魯氏 2-氨基-5-甲酰腺甘酸激Elisa
鴨疫里氏桿 3-氟-4-甲腺苷酸環(huán)化Elisa
乳糖細(xì)黃鏈霉 反式-2-己烯腺苷酸活化蛋白激Elisa