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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
保存條件：-20℃冰凍保存一年。 工作原理： 在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡，其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活 ，細胞自身的染色質或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的 dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結合在 DNA 斷點部位，可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后，再結合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC)，然后加入顯色底物 DAB 予以顯示。凋亡的細包核呈黃色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內(nèi)容： 1.標記緩沖液(Labeling Buffer)5ml 2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)100μl 3.DIG-dUTP(×20)100μl 4.封閉液(Blocking Reagent)20ml 5.生物素化抗抗體(×100)100μl 6.SABC(×100)100μl 7.Proteinase K(×200)250μl 8．抗體稀釋液 20ml |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
酚磺基轉移(PST)英文名稱：PST ELISA Kit22號染色體開放閱讀框9抗體包裝1g
胞外超氧化物歧化(SOD3)英文名稱：SOD3 ELISA Kit腫瘤高表達周期相關蛋白抗體包裝25g
半乳糖凝集9(GAL9)英文名稱：GAL9 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框117抗體包裝5g
半乳糖凝集7(GAL7)英文名稱：GAL7 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框120抗體包裝1g
半乳糖苷β(GLβ)英文名稱：GLβ ELISA Kit補體C1qα鏈多肽抗體包裝25g
半乳糖苷α(GLα)英文名稱：GLα ELISA Kit補體C1qγ鏈多肽抗體包裝5g
半乳凝8(GAL8)英文名稱：GAL8 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲蛋白激抗體包裝1g
半乳凝6(GAL6)英文名稱：GAL6 ELISA Kit老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體包裝5g
半乳凝4(GAL4)英文名稱：GAL4 ELISA Kit質多聚腺苷結合蛋白3抗體包裝1g
半乳凝2(GAL2)英文名稱：GAL2 ELISA KitComplexin I/復合1抗體包裝5g
半乳凝12(GAL12)英文名稱：GAL12 ELISA KitComplexin II/復合2抗體包裝1g
半胱豐富血管生成誘導因子61(CYR61)英文名稱：CYR61 ELISA Kit轉錄調(diào)節(jié)因子C/EBPγ抗體包裝25g
半胱蛋白抑制劑3(CST3)英文名稱：CST3 ELISA Kit質連接蛋白2抗體包裝5g
白細胞衍生趨化因子2(LECT2)英文名稱：LECT2 ELISA KitCD20抗體包裝100g
白細胞衍生趨化因子1(LECT1)英文名稱：LECT1 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框40抗體包裝500g
: AS3.800資源名稱: 米曲霉 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品印度猬因子試劑盒蕓苔內(nèi)酯;Brassinolide
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：>99.5%,一合物,BR,可用于培養(yǎng)隱熱蛋白試劑盒原薯蕷皂苷;Protodioscin
長棒孢Camposporium│sp. 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品2,3-雙加氧試劑盒乙酰黃芪皂苷I;Acetytastrag
細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)硬水黃桿 1,13-十三烷二流腦A型抗體Elisa
中型艾美耳球蟲 乙酸烯酯腎損傷分子Elisa
平菇 2-乙基-(5或6)-甲基吡腸道病71型抗體Elisa
粘質沙雷氏 N-乙基正丁骨成型蛋白5Elisa
球孢白僵 4-溴-2,5-二氟苯Caspase-1p20Elisa
假蜜環(huán)（亮） 2-哌甲酸艱難梭Elisa
1B2A3 2-氨基-3-硝基-5-溴-6-氯吡啶同源盒轉錄因子8抗體Elisa
黃薄芝 2-氯甲基咪唑啉鹽酸鹽沉默調(diào)節(jié)蛋白2Elisa
大腸桿 1-溴-2,5-二甲氧基-4-補體蛋白9Elisa
銅綠假單胞(綠膿桿) 6-肼基煙酸食欲AElisa
考克氏 二水合氨甲嘌呤狀瘤病Elisa
解脂假絲酵母解脂變種 2-三氟甲基-4-羧酸乙酯噻唑一氧化碳Elisa
釀酒酵母 2,3,5-三氟組織多肽特異性抗原Elisa
黃赭色鏈霉 2-甲氧基-4-(三氟甲氧)苯甲狀瘤病IgG抗體Elisa
釀酒酵母 鹽酸雷莫司瓊雄Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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