產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):SERCA激活劑(CDN1163)
英文名稱(chēng):CDN1163
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CDN1163是一種肌肉/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+-ATPase(SERCA)激活劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):892711-75-0 純度:99.12% 分子式:C??H??N?O? 分子量:320.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
孤島鹽單胞菌二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit類(lèi)人猿ELISA Kit
海南小短桿菌二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit類(lèi)人猿免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒
梾木生殼針孢基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit類(lèi)人猿巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
植物乳桿菌植物亞種乙?;M蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit類(lèi)人猿降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌乙酰化組蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit類(lèi)人猿降鈣(CT)免疫試劑盒
燼灰紅鏈霉菌果糖發(fā)酵亞種磷化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit類(lèi)人猿黃體生成(LH)免疫試劑盒
賴(lài)芽胞桿菌屬高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit類(lèi)人猿骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
根瘤菌磷化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪ELISA Kit
木蹄層孔菌組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睪(T)免疫試劑盒
黑木耳肝生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)免疫試劑盒
植物乳桿菌HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ基丁(GABA)免疫試劑盒
蟲(chóng)類(lèi)神食酵母瘤病調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA Kit鯨ELISA Kit
桔橙小單孢菌人類(lèi)狀瘤病18 E6單克抗體Human SCN4B ELISA Kit鯨孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
白鵝膏菌(不可訂購(gòu))異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit鯨狀腺原(T3)免疫試劑盒
沃氏富鹽菌異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit鯨皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
相思根瘤菌異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鯨甲狀腺(T4)免疫試劑盒
: N144資源名稱(chēng): 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in toluene常春藤皂苷元
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品D-松
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品可可堿
SERCA激活劑(CDN1163)phospho-Bim(Ser69) 化死亡調(diào)解子抗體烯異癸酯 98%,含70-100ppm對(duì)苯二酚穩(wěn)定劑
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗體亞油 99%
BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體1,2,3,4,5,6-六環(huán)己烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Bmi1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體1,2,3,4,5,6-六環(huán)己烷 97%
BLNK B淋巴連接蛋白抗體DL-乳鋰 97%
Phospho-BLNK(Tyr96) 化T淋巴連接蛋白抗體溶菌,雞蛋白 40000U/mg
BMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體亞麻 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ,≥99% (GC)
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)