詳細(xì)介紹
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人宮頸癌細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞;EC109-Cas9-573培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:19,20;D13S317:11,11;D16S539:12,12;D18S51:12,16;D19S433:13,13;D21S11:30,30;D2S1338:17,20;D3S1358:17,17;D5S818:12,12;D6S1043:13,13;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;;FGA:25,25;Penta E:16,16;TH01:9,9;TPOX:8,8;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞;EC109-Cas9-573培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞;EC109-Cas9-573培養(yǎng)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
NPD014 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK5(Ser129) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體規(guī)格: 0.1ml
C1orf172 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠IgM規(guī)格: 0.3ml
phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉蛋白4抗體規(guī)格: 0.1ml
TGF beta 3 轉(zhuǎn)移生因子β3(TGFβ3)抗體規(guī)格: 0.1ml
IL-2 白介素2抗體規(guī)格: 0.2ml
caspase-9 p10 半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗體規(guī)格: 0.2ml
FGF9 堿性成纖維細(xì)胞生因子9抗體規(guī)格: 0.2ml
HER2/NEU/ErbB2 HER2抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Ser385) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
ART4/CD297 二磷酸苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體規(guī)格: 0.2ml
SMC2 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Glucose 6 phosphatase alpha 葡萄糖6磷酸酶α抗體規(guī)格: 0.2ml
IGFBP3 胰島素樣生因子結(jié)合蛋白3抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-NFKBIA(Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗體規(guī)格: 0.1ml
Inhibin Beta C 抑制素βC抗體規(guī)格: 0.2ml
Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗體規(guī)格: 0.1ml
IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein 分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Caspase 5 半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體規(guī)格: 0.2ml三水FeNaEDTA(1KG)FeNaEDTA, 3H2O, CAS# 15708-41-5; MW 421.3
5-TAMRA[5-羧基四甲基羅丹明] 單體5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] Single isomer
TF7 胺 Cy7的代替品Tide Fluor 7 amine [TF7 amine] Superior replacement to Cy7
Caspase 8熒光底物Ac-IETD-AMCAc-IETD-AMC
鈣離子熒光探針Indo-1, AM 大包裝Indo-1, AM Bulk packaging
5-氨基改良劑 C6,MMT-保護(hù)(MMT-保護(hù)-5-氨基改良劑)5’-Amino-Modifier C6, MMT-protected
mFluor Blue 570-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mlmFluor Blue 570-streptavidin conjugate 1 mg/ml
藍(lán)色活細(xì)胞熒光探針Cytol BlueCytol Blue
Helix Fluor 555 琥珀酰亞胺酯Helix Fluor 555, succinimidyl ester
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞;EC109-Cas9-573培養(yǎng)CDDO methyl ester (10 mg)2-cyano-3,12-dioxo-oleana-1,9(11)-dien-28-oic acid, methyl ester; Bardoxolone methyl|NSC 713200|RTA 402|TP-155; CDDO methyl ester
PF-8380 (5 mg)4-[3-(2,3-dihydro-2-oxo-6-benzoxazolyl)-3-oxopropyl]-(3,5-dichlorophenyl)methyl ester-1-piperazinecarboxylic acid; PF-8380
15(S)-15-methyl Prostaglandin D2 (5 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-15-methyl PG2; 15(S)-15-methyl Prostaglandin D2
ethyl-2-amino-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylate (500 mg)2-amino-4-methyl-5-thiazolecarboxylic acid, ethyl ester; NSC 400231; ethyl-2-amino-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylate