詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
志賀氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) | 50T | GOY-M6233 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、腦膜炎敗血金黃桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
Rabbit Anti-Mink IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml*
EPDR1 哺動(dòng)物室管膜相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
BRCA1/BAP1 易感基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
CK4 細(xì)胞角蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Fc γ RII a/CD32 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體 規(guī)格: 0.1ml*
TLK1 調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Phospho-Numb (Ser276) 磷酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml*
H1N1 Hemagglutinin 2 甲型流感病毒凝素抗體 規(guī)格: 0.1ml*
MMP-16 基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-VAV3(Tyr173) 磷酸化鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體 規(guī)格: 0.1ml*
MOBKL2B Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體 規(guī)格: 0.2mlLRRC2 LRRC2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
OCIAD2 卵巢免疫反應(yīng)抗原抗體 規(guī)格: 0.2mlRNF113B 環(huán)指蛋白113B抗體 規(guī)格: 0.2ml*
CSF3/G-CSF 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落激因子3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-arfaptin 2(Ser260) 磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Phospho-cdc25A (Ser177) 磷酸化細(xì)胞周期蛋白25抗體 規(guī)格: 0.1mlATP1A1 鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Rabbit Anti-Avidin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1mlMAX protein Myc基因相關(guān)X因子抗體 規(guī)格: 0.1ml*
志賀氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)一抗稀釋液100ml瓶
一次性接種環(huán) 10ul(黃色)10支包
CollagenaseⅡ 膠原酶Ⅱ100mg支
Lycorine 石蒜堿476-28-820mg
Solanesol 茄尼醇67920-52-920mg
Eleutheroside E 五加苷E39432-56-920mg
Baicalin 黃芩苷21967-41-910mg
Isoeugenyl acetate 乙?;惗∠惴?3-29-820mg
Fenbendazole 芬苯達(dá)唑-苯硫咪唑43210-67-9100mg
蓋玻片 18×18mm100片盒
磁力攪拌子35mm只
3,3'-Diaminobenzidine 3,3'-二氨基二苯胺1g瓶
PEG 8000 聚乙二醇 80005kg瓶
Kinetin 激動(dòng)素250mg支
2% TTC染色液500ml瓶
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。