詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
TP胸腺嘧啶核苷磷酸化酶ELISA Kit | TP ELISA Kit | GOY-E99949 |
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4) 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
虹膜色素上皮細胞 1×106 5×106
晶狀體上皮細胞 1×106 5×106
角膜上皮細胞 1×106 5×106
角膜內(nèi)皮細胞 1×106 5×106
視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 1×106 5×106
表皮角化細胞 1×106 5×106
成纖維細胞 1×106 5×106
皮膚肥大細胞 1×106 5×106
前脂肪細胞 1×106 5×106
腎實質(zhì)細胞 1×106 5×106
腎系膜細胞 1×106 5×106
腎小球內(nèi)皮細胞 1×106 5×106
腎小管上皮細胞 1×106 5×106
膀胱上皮細胞 1×106 5×106
TP胸腺嘧啶核苷磷酸化酶ELISA KitHCMV UL49 人巨細胞病毒UL49蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCoronin 1a 肌動蛋白結合蛋白CORO1A抗體 規(guī)格: 0.2ml
GBP5/Guanylate binding protein 5 鳥嘌呤核苷酸結合蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlC2ORF47 2號染色體開放閱讀框47抗體 規(guī)格: 0.2ml
GLP-2 胰高糖素樣肽-2抗體 規(guī)格: 0.1mlHSP60 熱休克蛋白-60抗體 規(guī)格: 0.1ml
CRHR2 促上皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 規(guī)格: 0.1mlTSPAN4 四分子交聯(lián)體4抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml
Fx1A 刷狀緣抗體 規(guī)格: 0.2mlVG5Q/AGGF1 管生因子VG5Q抗體 規(guī)格: 0.2ml
Vinculin 粘著斑蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlG protein beta 2/GNB2 G蛋白β2抗體/鳥嘌呤核苷酸結合蛋白β亞基2 規(guī)格: 0.2ml
RNF11 環(huán)指蛋白11抗體 規(guī)格: 0.2mlMAS1 GTP結合蛋白MAS1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rad17/RFC 細胞周期檢控Rad17蛋白抗體(復制因子C) 規(guī)格: 0.1mlTankyrase 端粒調(diào)控因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
DNA Polymerase beta DNA聚合酶β抗體 規(guī)格: 0.2mlDCK 脫氧胞苷激酶抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PDGFRA(Tyr754) 磷酸化小板源性生因子受體-α抗體 規(guī)格: 0.1mlGLUR 谷胱甘肽還原酶抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361) 磷酸化胰島素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml
phgophs-ATG4C(Ser177) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 規(guī)格: 0.1ml
AMSH 信號轉(zhuǎn)導銜接結合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體 規(guī)格: 0.2ml
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。