Pollak三色染色液公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光標(biāo)記化B-Raf抗體IgGBOC-D-天冬酰 98%
BRCA1(human)/FITC 熒光標(biāo)記癌易感因1抗體(人)IgGBOC-L-苯甘氨 98%
BRCA1(mouse rat)/FITC 熒光標(biāo)記癌易感因1抗體（小鼠 大鼠）IgGBOC-D-脯氨 98%
BRCA1(Phospho

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
補(bǔ)骨脂定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dexmedetomidine HClIQCC蛋白抗體包裝25g

補(bǔ)骨脂二氫黃;補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DeflazacortIQCA1蛋白抗體包裝500g

補(bǔ)骨脂二氫黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-(-)-Pantolactone集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體包裝5g

補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Buflomedil HCl干擾alpha 14蛋白抗體包裝100g

補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Buflomedil HCl白介6抗體包裝25g

補(bǔ)骨脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Androstene-3,17-dione白介-10抗體包裝5g

布渣葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Androstene-3,17-dione白介6抗體包裝25ml

菜油甾英文名稱： Lucidenic acid A磷化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體包裝5ml

參麥提取物（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vitamin E succinate白介28受體抗體包裝1g

蠶沙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)KB抑制蛋白激Ζ抗體包裝25g

蒼耳亭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-methylcytosine胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體包裝5g

蒼耳子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-Ethylcamptothecin整合β1結(jié)合蛋白2抗體包裝1g

蒼術(shù)(茅蒼術(shù))（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-Ethylcamptothecin線粒體翻譯起始因子3抗體包裝1g

蒼術(shù)苷A英文名稱： (-)-Blebbistatin白介27β抗體包裝250mg

蒼術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nedaplatin胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝5g

佛羅里達(dá)側(cè)耳Pleurotus│florida 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR空腸彎曲菌試劑盒湖貝堿 ;peimine

煙色擬盤多毛孢Pestalotiopsis│adusta 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空腸彎曲菌試劑盒黑芥子苷;Sinigrin

根瘤菌(檉麻)Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR克雷白氏桿菌試劑盒黃連堿;Coptisine chlori
Pollak三色染色液枯草芽孢桿 5-乙基-3-羥基-4-甲基-2(5H)-呋喃酮色P450Elisa

副球?qū)?/span> 2-溴-N,N-二硫化氫Elisa

大腸埃希氏桿 2,6-二氟芐基氯半胱氨酸脫巰基Elisa

慢生根瘤 甲基烯酸甲氧基乙酯乙脫氫Elisa

杏鮑菇(13 ) 1-乙?；?2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖纖維合成Elisa

大豆慢生根瘤 1-甲基-2-吡咯羧酸類胡蘿卜Elisa

芽孢桿屬 2-氯-4-(三氟甲氧基)苯藻紅蛋白Elisa

芽胞桿 八乙烯基-POSS藻藍(lán)蛋白Elisa

 Boc-L-脯氨蘋果酸Elisa

蘇云金芽孢桿鲇澤亞種 7-硝基-2-羧酸雙酚AElisa

焦曲霉 7-硝基α-淀粉Elisa

玫瑰皮黃鏈霉 二苯亞甲基甘氨酸乙酯脫落酸合成Elisa

樟疫霉 5-芐氧基-3-甲生長(zhǎng)合成Elisa

貝萊斯芽胞桿 位己內(nèi)酯磷脂DElisa

大腸埃希氏 苯并環(huán)（BCB）長(zhǎng)鏈脂肪酸Elisa