ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。
具有如下優(yōu)點(diǎn)：
    一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

性能：
1) 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2) 靈敏度：檢測(cè)濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4) 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6) 有效期：6個(gè)月
注意事項(xiàng)：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞 1×106 5×106

腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 1×106 5×106

腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞 1×106 5×106

腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 1×106 5×106

小梁網(wǎng)細(xì)胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜müller細(xì)胞 1×106 5×106

虹膜色素上皮細(xì)胞 1×106 5×106

晶狀體上皮細(xì)胞 1×106 5×106

角膜上皮細(xì)胞 1×106 5×106

角膜內(nèi)皮細(xì)胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 1×106 5×106

表皮角化細(xì)胞 1×106 5×106

BRCA-1乳腺癌易感蛋白1ELISA KitPhospho-NMDAR1(Ser896)  磷酸化谷氨酸受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Tuberin/TSC2(Ser1420)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

FXR1  脆性X相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlBASC4  擴(kuò)增序列蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 2mlNG2/CSPG4  黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Smac/DIABLO  線粒體促凋亡蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-TAK1(Ser412)  磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激酶1 規(guī)格: 0.1ml

LTB4-R2  白三烯B4受體2抗體 規(guī)格: 0.1mltubulin Beta  微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β 規(guī)格: 0.1ml

AXL/UFO  粘附相關(guān)激酶抗體 規(guī)格: 0.1mlODC  鳥(niǎo)氨酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1mlCSFV/Classical swine fever virus  豬瘟病毒抗體 0.2ml

HEC1  細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體 規(guī)格: 0.2mlDCAF12/WDR40A  睪中心體相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlZnT-1  鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Jun B  活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC5  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.3mlRab27a  RAM-11抗體 規(guī)格: 0.2ml

C4orf14  4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框14抗體 規(guī)格: 0.2mlglypican 3/GPC3  磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 規(guī)格: 0.1mlLGI1/ETL1  富含亮氨酸膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CARD15  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。