改良Bielschowsky神經(jīng)染色液公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-GAB2 (Ser623) /FITC 熒光標(biāo)記化接頭蛋白Gab 2抗體IgG五化銻 CP（劇品）
GAD-65/FITC 熒光標(biāo)記谷氨脫羧-65抗體IgG酮 96%（劇品）
GAD-65(CT)/FITC 熒光標(biāo)記谷氨脫羧-65抗體(C端多肽)IgG皂土(膨潤(rùn)土) Bentone SD-1，適于中至低性溶劑
GAD-

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： ANTHRALIN一氧化氮合成-2抗體（誘導(dǎo)型）包裝5g

氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 4-Hydroxyphenylacetamide腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體包裝100g

氧化槐果堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prochlorperazine神經(jīng)激肽A抗體包裝25g

氧化苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Prochlorperazine磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g

氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： TGX-221磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝1g

氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝25g

藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Phenprobamate膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g

野百合堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Halcinonide谷受體2A抗體包裝1g

野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Choline chloride磷化谷受體2B抗體包裝25g

野黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ganoderic acid G 谷受體2B抗體包裝5g

野菊花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pipemidic acid磷化核仁磷蛋白抗體包裝1g

野馬追（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE磷化核仁磷蛋白抗體包裝5g

野馬追內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-Brusatol磷化核仁磷蛋白抗體包裝100g

野馬追內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prazosin HCl核因子κB抑制蛋白β抗體包裝25g

野馬追內(nèi)酯K英文名稱： 7-Hydroxycoumarin磷化谷受體2A抗體包裝5g

擬皺褶假絲酵母Candida│pseudorugosa 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品角化生長(zhǎng)因子試劑盒蟲(chóng)草;Cordycepin

: ivcas7.01205資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR角化內(nèi)分泌因子試劑盒常春藤皂苷元;Hederagenin

: IFFI3078資源名稱: 少根根霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品膠轉(zhuǎn)蛋白試劑盒蟾靈;Bufalin
改良Bielschowsky神經(jīng)染色液靈芝 8-溴鳥(niǎo)苷胸腺嘧啶核苷磷酸化Elisa

球芽孢桿 5-氨基吡-2-羧酸胸腺β4Elisa

彎孢 5-甲氧基吡-2-甲酸雄Elisa

解淀粉芽孢桿 4--2-甲雄烯二酮Elisa

灰黃青霉 4-(二甲基羰基)苯酸酸二羥基己二酯溴脫氧核苷尿嘧啶Elisa

云南假諾卡氏 5-溴-1,10-菲啰啉血管活性腸肽Elisa

琥珀乳牛肝 2--6-氟苯并噻唑血管緊張1-7Elisa

細(xì)囊殼 1-基-4-[2-(4-甲氧苯基)乙炔基]苯血管緊張IVElisa

微小鏈霉 4-氟-2-羧酸血管緊張轉(zhuǎn)化Elisa

季也蒙假絲酵母 (1,2,4)噻唑并(1,5-a)吡血管內(nèi)皮鈣粘蛋白Elisa

球毛殼（可訂購(gòu)） 2,4-二羥基吡咯[2,3-d]嘧啶血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子Elisa

煙色小核鏈霉 吡啶-2-甲酰鹽酸鹽血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子AElisa

孟氏假單胞 5-溴-4-氟-2-羥基苯甲血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子BElisa

假單胞 2-羥基-5-甲氧基苯血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Elisa

草木樨中華根瘤 2--5-乙酸吡啶血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa