詳細(xì)介紹
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:南非諾卡菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6138
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Rabbit Anti-Biotin/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml*
SERPINI2/PI14 蛋白酶抑制劑14抗體 規(guī)格: 0.2ml*
BMPR1A/CD292 骨成型蛋白受體1A抗體 規(guī)格: 0.1ml*
SREBP-1 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
JNK1/3 氨基末端激酶1/3抗體 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-ANAPC1 (Ser355) 磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Donkey Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml*
Rabbit anti-human IgG F(ab')2 whole serum 兔抗人IgG F(ab')2抗清 規(guī)格: 1ml*
ANKRD53 錨蛋白重復(fù)域53抗體 規(guī)格: 0.2ml*
GLUT5 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-RAC1(Ser71) 磷酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 規(guī)格: 0.1ml*
VAP1 管粘附蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
AFP(A4) 甲胎蛋白單克隆抗體(檢測) 規(guī)格: 0.2ml*
Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml*
MTGR1 髓易位基因相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
南非諾卡菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)6,7-Dihydroxycoumarin 秦皮乙素305-01-120mg
Acetovanillone 香草酮-香草乙酮498-02-210mg
ans-o-Coumaric Acid 鄰羥基肉桂酸614-60-820mg
尼龍篩網(wǎng)(1m×1m)500目包
Cimetidine 西咪替丁-西米替汀51481-61-9100mg
175cm2正方斜口濾膜培養(yǎng)瓶5個包
Citicoline sodium 胞磷膽堿鈉1g瓶
0.5M EDTA (PH8.0)500ml瓶
IS-HCl is鹽酸100g瓶
Van Gieson 染色液(VG染色液)100ml瓶
霉素溶液(50mg/ml)10ml瓶
Acetylcholinesterase 乙酰膽堿酯酶250mg瓶
TSA Agar 胰蛋白胨大豆瓊脂TSA250g瓶
RNA酶抑制劑10000u支
羊抗豬IgG-FITC0.3ml支
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。