詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
2×50ml|2×100ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 膠原纖維染色、分型 注意事項: 偏振光顯微鏡觀察,Ⅰ型膠原纖維呈橙黃色或紅色,Ⅲ型膠原纖維呈綠色,主要成分還包括Mayer蘇木素。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
常春藤苷D英文名稱: Quinine hydrochloride dihydrate支架蛋白抗體包裝5g
常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷英文名稱: 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE非洲爪蟾IGC抗體包裝25g
常春藤皂苷元(標準品)英文名稱: Picoplatin干擾誘導跨膜蛋白1抗體包裝5g
常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷英文名稱: 4-NitrobenziMidaMide HCl干擾β抗體包裝100g
常山(標準品)英文名稱: Ureaγ-干擾/γ-IFN單克抗體包裝25g
巢脾(標準品)英文名稱: Dehydronandrolon干擾-γ/IFN-γ抗體包裝5g
朝藿定A(標準品)英文名稱: Fumaric acid干擾-γ/IFN-γ抗體包裝1g
朝藿定A1(標準品)英文名稱: Danofloxacin mesylate胰島樣生長因子I受體抗體包裝5g
朝藿定C(標準品)英文名稱: Danofloxacin mesylate胰島樣生長因子1受體抗體包裝1g
車前草(標準品)英文名稱: Calcium Alginate胰島樣生長因子結合蛋白2抗體包裝25g
車前草(車前)(標準品)英文名稱: Mephenoxalone胰島樣生長因子結合蛋白5抗體包裝5g
車前草苷D英文名稱: Lecithin胰島樣生長因子1抗體包裝250mg
車前子(車前)(標準品)英文名稱: Lecithin from egg胰島樣生長因子-II抗體包裝1g
車葉草苷(標準品)英文名稱: Vilanterol;GW642444白介10抗體包裝5g
沉香(標準品)英文名稱: PD-98059白介13抗體包裝100mg
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質量規(guī)格:單酯含量大于40%可溶性胸苷激1試劑盒槲皮-7-O-葡萄糖苷;Quercet
: AS1.16資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規(guī)格:純度≥50%,油狀液體可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1試劑盒葒草苷;Orientin
球孢鏈霉菌Streptomyces│globisporus 質量規(guī)格:>95.0%,BR可溶性間皮相關肽試劑盒;Tetrodotoxin
天狼星紅染色液假單胞屬 5-氟靛紅果糖-1,6-二磷酸Elisa
平菇新農1號 2-氯異煙酸甲酯甜菜堿脫氫Elisa
沙針草狀孢 硬脂酰苯甲酰5-磷酸核糖激Elisa
灰紅鏈霉 2-巰基四氫-1,3-噁唑檸檬酸裂解Elisa
茄拉爾氏 5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉轉移Elisa
膠質芽孢桿* 2-溴-5-羥基多Elisa
釀酒酵母 2-溴-4-葡萄糖脫氫Elisa
紅法夫酵母* 2-羥基-3-氯-5-溴吡啶鈣調蛋白Elisa
布萊克威爾假絲酵母 5-氨基-1-(2-)-1H-吡唑-4-甲酸谷氨酰合成2Elisa
豬丹絲 鏈霉內肽Elisa
枯草芽孢桿 3-溴-2-乙氧基吡啶α-L阿拉伯呋喃糖苷Elisa
馬腸鏈球 2-氯-3-甲基喹啉β半乳糖苷Elisa
木蹄層孔 2-吡甲胰蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 3-氨基苯并呋喃-2-甲酸甲酯胰蛋白抑制劑Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 N-叔丁氧羰基-4-乙基-4-甲酸甲酯水解Elisa