詳細(xì)介紹
商品介紹:
Colchicine溶液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料配制,用于生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。 儲(chǔ)存條件:2-8℃密封保存。 有效期:一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
25ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
西尼地平英文名稱: Ketanserin Tartrate脊索生成樣蛋白1抗體包裝5g
纈沙坦英文名稱: Ketoconazole神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill抗體包裝25g
鹽阿米洛利英文名稱: Ketoconazole二氫嘧啶相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
鹽艾司洛爾英文名稱: Kitasamycin轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體包裝1g
鹽英文名稱: Latanoprost神經(jīng)網(wǎng)蛋白CopineVI抗體包裝5g
鹽巴尼地平英文名稱: Lenalidomide腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移1C抗體包裝1g
鹽貝那普利/那普利英文名稱: Lenalidomide補(bǔ)體因子B抗體包裝25g
鹽貝尼地平英文名稱: Letrozole乙酰受體前體蛋白AChRα1抗體包裝5g
鹽地爾硫卓英文名稱: Letrozole豬瘟病包膜糖蛋白E2抗體包裝100g
鹽丁咯地爾英文名稱: Leuprorelin Acetate (Leuprolide Acetate)冷休克結(jié)構(gòu)域蛋白C2抗體包裝25g
鹽多巴酚丁英文名稱: Levetiracetam碳酐10抗體包裝500g
鹽桂利英文名稱: LevetiracetamL選擇抗體包裝100g
鹽決奈達(dá)英文名稱: Lincomycin HCl致癌基因C-Myc抗體包裝25g
鹽喹那普利英文名稱: Lincomycin HCl膽囊收縮8抗體包裝500g
鹽拉貝洛爾英文名稱: Liothyronine sodium上皮鈣粘附分子抗體包裝5MG
黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品煙酰腺嘌呤二核苷試劑盒亞麻乙酯;Linolenic acid
毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:含量≥590 µg/mg牙骨質(zhì)蛋白1試劑盒乙酰;Acetylaconitin
殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1試劑盒鹽黃連堿;Coptisine chlo
Colchicine米根霉 氯草定亞精Elisa
橄欖色盾殼霉 苯并[e]芘垂體腺苷酸環(huán)化激活肽Elisa
哈茨木霉 3-氟-4-基P53抗體Elisa
裂孔平伏 2,4,5-三磷酸化糖原合成激3βElisa
禾炭疽盤孢 嘧酯蛋白激CElisa
匍枝根霉原變種 霉酚酸嗎啉乙酯弓形蟲抗體Elisa
寬褶奧德蘑 3,4,5-氧基球蛋白Elisa
淺紫灰鏈霉淺紫灰亞種 分散藍(lán) 35血氨Elisa
角殼囊孢 酰嘧磺隆白抗原DRElisa
維斯假絲酵母 四唑嘧磺隆絲氨酸蛋白抑制因子3Elisa
根瘤屬 5-降烯-2-甲犬尿氨酸Elisa
費(fèi)氏曲霉 銳勁特ACTG1Elisa
灰離褶傘 (S)-(-)-1,1,2-三苯基-1,2-丁二2-醋酸酯球蛋白G4抗體Elisa
施氏假單胞 惡唑半胱氨酸Elisa
短芽孢桿 (R)-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-乙二2-乙(醋)酸酯EB病Zta蛋白IgA抗體Elisa