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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>>Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)

          Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)

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          • Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)

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          • 廠商性質 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 15:56:03瀏覽次數(shù):201

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T|100T
          貨號 GOY-01X9867 應用領域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)公司*的產(chǎn)品:Substance P P物質抗體納迪克酐 95%
          TSFP1/SP1 轉錄生長因子SP1抗體硬脂酯 CP,45%(GC)
          TPA/PLAT 組織型纖溶原激活劑抗體2-吡啶 98%
          SUZ12/CHET9 胚胎干抑制蛋白Suz12抗體二鈉 99%
          SP-A 肺表面活性蛋白A抗體錫鈉 CP,53.67% SnO2
          SPA

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)

          英文名稱:

          產(chǎn)品規(guī)格:50T|100T

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          鈣離子檢測試劑盒采用Fluo-3,AM 細胞內鈣離子濃度的熒光探針檢測鈣離子。

          Fluo-3,AM穿透細胞膜進入細胞后被細胞內的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細胞內。

          Fluo-3 游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。但是,當它與細胞內鈣離子結合后可以產(chǎn)生較強的熒光,熒光會增加60 至100 倍,大激發(fā)波長為506nm,大發(fā)射波長為 526nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm 左右,發(fā)射波長為 525~530nm。可以使用熒光顯微鏡、酶標儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內鈣離子濃度的變化。

          儲存條件:-20℃避光保存。

          有效期:一年。

          細胞生物學研究有以下幾個方面:

          細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:

          ①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

          ②生物膜與細胞器的研究;

          ③細胞骨架體系的研究;

          ④細胞增殖及其調控;

          ⑤細胞分化及其調控;

          ⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細胞的起源與進化;

          ⑧細胞工程.

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          (狼大戟)(標準品)英文名稱:  Dacthal顆粒A抗體包裝5g

          狼(月腺大戟)(標準品)英文名稱: 1-Chlorooctane顆粒D/B/E/N/G/F/H抗體包裝25g

          狼乙(標準品)英文名稱: Dodecane粒-巨噬集落激因子3受體抗體包裝5g

          老鸛草(標準品)英文名稱: Bismuth solution血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝1g

          老鶴草(標準品)英文名稱: Copper solutionG蛋白修補結構域蛋白3抗體包裝25g

          老龍皮;網(wǎng)脊衣 A(標準品)英文名稱: Copper solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體包裝5g

          老蛇蓮(標準品)英文名稱: Cobalt standard磷化珠蛋白轉錄因子1抗體包裝250mg

          (標準品)英文名稱:  Chromium StandardG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝1g

          雷酚內酯(標準品)英文名稱: Erbium standardG蛋白偶聯(lián)受體15抗體包裝5g

          雷公藤春堿英文名稱: Gold solution粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g

          雷公藤次堿(標準品)英文名稱: Iridium standard solution生長停滯特異性蛋白8抗體包裝5g

          雷公藤定堿英文名稱: Nickel standardG蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體包裝1g

          雷公藤紅(標準品)英文名稱: Potassium standard磷脂?;鞍拙厶?5抗體包裝100g

          雷公藤(標準品)英文名稱: Praseodymium standardGADD45γ相互作用蛋白1抗體包裝25g

          雷公藤晉堿英文名稱: Tungsten solutionGTP結合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白)包裝5g

          紫色小單孢菌Micromonospora│violacea 質量規(guī)格:>98%,半合物橋粒糖蛋白2試劑盒米力農(nóng);Milrinone

          : ivcas7.00075資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品羥賴糖苷試劑盒馬兜鈴;Aristolone

          鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:>97%,USP grade羥賴試劑盒馬兜鈴B;Aristolochic a
          Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)自養(yǎng)假諾卡氏 4-硝基-7-哌-2,1,3-苯并惡二唑[用于高效液相色譜標記]白介14Elisa

          冷海水黃桿 N,N'-二(萘-2-基)-N,N'-二(苯基)聯(lián)苯-4,4'-二程序性死亡配體-1抗體Elisa

          野油菜黃單胞棲絨毛致病變種 Fmoc-D-3-(1-萘基)氨酸叉頭框蛋白N3Elisa

          紅酵母 溴化釓(III)鈉轉運體抗體Elisa

          釀酒酵母 1-氯甲酸芴甲酯-(S)-吖丁啶-2-羧酸鈉轉運體Elisa

          半膠蘑菇(暫定名) 2,4,6-環(huán)庚三烯-1-甲黃色葡萄球的Cas9核酸Elisa

          拜耳接合酵母 2,5-二乙酸黃色葡萄球的Cas9核酸抗體Elisa

          Promicromonospora Val-Ser環(huán)形交叉軸突導向受體同源物4Elisa

          擬香味類香味 4-甲氧基-1-茚酮天冬酰內肽Elisa

          沙氏芽孢桿 Go 6983TCF4Elisa

          姬松茸* 環(huán)氧烯縮二乙正絲氨酸蛋白抑制劑E2Elisa

          釀酒酵母 2,2′-[(4,s)-4-苯基-2-噁唑啉]水痘帶狀皰疹病gE抗體Elisa

          熱帶假絲酵母 2-己基環(huán)戊酮補體片段4dElisa

          樟疫霉 L-乙硫氨酸補體片段4aElisa

          檸檬色葡萄球 4-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯集落激因子1Elisa 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結果分析

          a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

           


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