商品介紹:
Nepafenac(AHR9434;AL6515;Nevanac)是COX-2抑制劑,是Amfenac的原藥。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):78281-72-8 別名:AHR 9434;AL 6515 純度:99.12% 分子量:254.28 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:COX-2抑制劑(Nepafenac)
英文名稱:Nepafenac
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Pseudoxanthomonas動(dòng)力蛋白激活蛋白6抗體Human RERGL (Ras-related and estrogen-regulated growth inhibitor-like protein) ELISA KIT人α-黑色激(α-MSH)免疫試劑盒
絨奧德蘑脫2抗體Human RASSF1 (Ras association domain-containing protein 1) ELISA KIT人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒
斑點(diǎn)青霉磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) ELISA KIT人α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
耐寒短桿菌防御α4抗體Human R3HCC1 (R3H and coiled-coil domain-containing protein 1) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白4(ACTN-4)免疫試劑盒
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體Human SPDEF (SAM pointed domain-containing Ets transcription factor) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)免疫試劑盒
炭疽健康皮張抗原DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體Human RTBDN (Retbindin) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒
凝結(jié)芽胞桿菌CD299抗體Human PEAK1 (Pseudopodium-enriched atypical kinase 1) ELISA KIT人α-防御4(NP-4)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT人α淀粉(AMY1)免疫試劑盒
雅致放射毛霉C型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體Human PTK2B (Protein-tyrosine kinase 2-beta) ELISA KIT人α半乳糖基(α-Gal)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌B淋巴銜接分子DAPP1抗體Human RABGAP1 (Rab GTPase-activating protein 1) ELISA KIT人α半乳糖苷(αGAL)免疫試劑盒
微小根毛霉DNA1樣蛋白1抗體Human PINK1(Serine/threonine-protein kinase PINK1, mitochondrial) ELISA Kit人αN已?;咸擒?αNAG)免疫試劑盒
根瘤菌抗菌蛋白DCD抗體Human PURB (Transcriptional activator protein Pur-beta) ELISA KIT人αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒
畢赤酵母肌動(dòng)蛋白解聚因子抗體Human REP15 (Rab15 effector protein) ELISA KIT人αL艾杜糖苷(IDUA)免疫試劑盒
斯瓦特貝赫山克里布所菌甘油二酯?;D(zhuǎn)移2抗體Human RABIF (Guanine nucleotide exchange factor MSS4) ELISA KIT人α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
中國臺(tái)灣根霉DHX15蛋白抗體Human PURG (Purine-rich element-binding protein gamma) ELISA KIT人α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒
頂孢頭孢霉DIAPH2蛋白抗體Human RALGPS1 (Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor RalGPS1) ELISA KIT人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3谷單鈉鹽
除烴海桿菌Marinobacter│hydrocarbonoclasticus 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:鵝去氧膽
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:1%HCl去氧膽鈉
COX-2抑制劑(Nepafenac)巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ProbenecidC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體包裝5mg
白藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norfloxacin腦鈣粘蛋白12抗體包裝1g
白消安(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norfloxacin鈣粘蛋白20抗體包裝1g
棓酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norfloxacin HCl鈣粘蛋白29抗體包裝5g
胞嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norfloxacin HClCD200受體抗體包裝1g
胞嘧啶核苷,胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indometacin鈣粘蛋白26抗體包裝5g
保泰松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indometacin鈣粘蛋白14抗體包裝50mg
保泰松鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cimetidine鈣激活離子通道蛋白3抗體包裝1g
貝美格(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CimetidineCD200受體抗體包裝5g
貝那普利拉/那普利拉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adefovir dipivoxil彈性蛋白1抗體包裝1g
貝諾酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adefovir dipivoxil干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g
蓓薩羅丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: R-Pramipexole Dihydrochloride MonohydrateCD99樣蛋白2抗體包裝1g
酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clozapine鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體包裝250mg
諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clozapine緊密連接蛋白15抗體包裝1g
丁氮芥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Enrofloxacin 緊密連接蛋白12抗體包裝5g